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标题: 求助！文献中的这种转基因动物模型该怎么理解 [打印本页]

作者: xxganxibao 时间: 2015-12-17 15:11 标题: 求助！文献中的这种转基因动物模型该怎么理解

本帖最后由 xxganxibao 于 2015-12-17 15:12 编辑

原文：P53L（L是上标，打不出来） and hGFAP-Cre mice have been described previously. PtenL（L也是上标） mice were generated using a standard knock-in approach in which Pten exon 5 is flanked by loxP sites. Mice were interbred and maintained on FvB/C57Bl6 hybrid background.

这篇文章（P53 and Pten control neural and glioma stem/progenitor cell renewal and differentiation）讲的是P53和Pten都使用cre-lopx技术敲除的老鼠，有以下几个问题：0 ?$ c! Y. t v+ l, S, w; V
1. 上标的L是什么意思？一般看到的都是-/-这种代表等位基因上都敲除，也见到过L/L这种，是代表着Loxp的意思吗？单个的L是代表什么意思呢？
2.Mice were interbred and maintained on FvB/C57Bl6 hybrid background这句话该如何理解？! o `- p/ c2 R# V( p3 W# j
3.这类敲除两个基因的老鼠是通过分别敲除一个基因的老鼠杂交得来的吗？能够稳定遗传这种性状吗？
求大侠解答，不胜感激！

作者: moluxingke 时间: 2015-12-17 17:07

1. 单说L不知道什么意思，但是根据你给出的信息，推测应该是loxp/loxp的意思，这类小鼠通过与Cre小鼠交配，繁育出条件性敲除的后代小鼠。 w* w4 ?* i0 O( F+ {
2. 一般来讲，两种交配的小鼠可能背景不一样，比如Cre小鼠可能是FvB背景，而loxp是C57背景，配出来的小鼠就是杂合背景的小鼠，但是以后繁殖的小鼠仅限于这些后代之间相互交配，不再引入其他背景，这样做为了保持实验的稳定性。
3. 题目给出的信息不全，你要敲除的这两个基因是要在同一种组织里面敲除吗？如果是，那么可以先配成p53loxp/loxpPTENloxp/loxp再与Cre的小鼠繁育。但是为了省时间，一般会单独先配单敲的，另外还要考虑你要用多少笼位，这还涉及到你的饲养成本的问题。

作者: xxganxibao 时间: 2015-12-17 17:47

本帖最后由 xxganxibao 于 2015-12-17 17:48 编辑 7 ?8 k% |3 o# ]2 k0 D* u+ v
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回复 moluxingke 的帖子# J* b6 D, ^4 ^2 z# R) h) ?. G& G

是在同一组织内敲除的，神经干细胞。
还有一点不太明白，请您指教：比如说在FvB小鼠内转入P53LoxpLoxp 以及PTENLoxpLoxp，在C57小鼠内转入Cre，杂交后形成P53、PTEN都敲除的后代，这样是纯合的；如果分开来做，分别配成P53loxp+Cre的FvB小鼠和PTENloxp+Cre的C57小鼠，两者再杂交，后代不就成了杂合的了吗？
刚刚开始看这方面知识，问题可能比较浅显，请您不吝赐教。谢谢！

作者: moluxingke 时间: 2015-12-19 10:32

有点儿不太明白你说的意思：“比如说在FvB小鼠内转入P53LoxpLoxp 以及PTENLoxpLoxp，在C57小鼠内转入Cre，杂交后形成P53、PTEN都敲除的后代，这样是纯合的” 。如果杂交后p53和PTEN都敲除了，那么肯定已经引入了C57背景的Cre，那么此时的敲除小鼠应该是杂合的吧？不论你怎么交配，后代的Cre-p53loxp/loxp; PTENlxop/loxp小鼠都是杂合的呀。

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