* i: t# F l$ {7 N- j2.4细胞侵袭力检测SP表型细胞穿过人工基底膜的细胞数为（66.6±4.0）个，MP表型细胞仅为（18.2±1.9）个. 两组间差异有统计学意义（P 5 Y# b) |! t) y6 e$ p9 A " D* A- Q. Q. L3 g图3MHCC97边缘群（SP）和主群（MP）细胞30 d成瘤 % L6 y) }0 L8 K! R8 }& l' F$ @( [: U1 H+ }+ @, B, W) S% @
3讨论 - X: k7 ]; M* w1 D2 W' |) }0 c1 ~* [' @ j) u/ X/ [
目前利用干细胞通用分子标记ABC转运蛋白(ATPbinding cassette transporter)高效外排荧光染料的特性进行SP细胞分选［2-3］. 2004年，Kondo等［4］在C6，MCF7，Blo4和Hela 4个细胞系中检测到了SP细胞，并提示SP是适用于肿瘤干细胞检测与分选的一种方法. 我们对肝癌细胞系MHCC97流式分选出SP和MP细胞两个亚群. 从实验数据上看，无论是软琼脂克隆形成的体外实验还是裸鼠成瘤的体内实验，SP细胞均表现出明显强于MP细胞的增殖和成瘤能力. 这与造血系统、人乳腺癌及神经系统肿瘤中肿瘤干细胞比非干细胞具有更高的成瘤潜能一致［5-6］. 但实验中1105 MP组也有肿瘤形成，其原因可能是这种通过干细胞功能学标志得到得SP亚群并不能代表所有的肿瘤干细胞. $ F% K$ a& P- Z( F* y8 Z 6 X x0 J/ u ~: m; sTu等［7］认为干细胞的迁移和癌细胞的转移皆受特异化学因子及其受体的调节. 干细胞能够迁移到特定的组织和器官，而这可以解释肿瘤转移也有一定器官和组织特异性. Ho等［8］也证实在肺癌中SP亚群细胞具有强于其它细胞的侵袭能力. 目前利用Matrigel胶重建基底膜系统是体外研究肿瘤细胞侵袭和转移行为的简便且快速的方法［9］. 细胞侵袭穿过重建Matrigel的能力反映该细胞的侵袭能力. 实验结果表明SP细胞24 h穿过人工基底膜的细胞数远多于MP亚群. 提示SP亚群细胞的存在可能是导致肝癌转移和复发的主要原因之一. # I6 M* o/ l/ q* _- E# B ) ?% S* @# x: v我们的结果表明，肝癌细胞系MHCC97中SP亚群细胞具有很强的成瘤性和侵袭性，也表明其具有一定的干细胞特性. 与上述结论相关的具体分子机制及直接因果关系还有待进一步探讨，目前尚不能证明SP亚群中百分之百的细胞都具有干细胞特性，同时并非所有肿瘤干细胞都具有SP特性［10］. 若结合其他干细胞表面标志如Sca1，ckit，CK7，Thy1［11］可进一步纯化具有干细胞特性的肝癌细胞. 总之，针对具有干细胞特性的SP亚群细胞的研究将在肝癌的治疗中具有重要的临床意义.% w% [" o0 D/ q* F8 _9 Y
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