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标题: 脐带酶消化法中的一种杂细胞 [打印本页]

作者: huajie881026    时间: 2012-10-11 23:40     标题: 脐带酶消化法中的一种杂细胞

脐带用酶消化法(胶原酶+透明质酸酶+胰酶)分离MSCs时,在第十天培养瓶中出现一种杂细胞,消化时这种细胞短时间消化不下来。查了下文献,感觉像是内皮祖细胞?(脐带只剥离了两根脐动脉,脐静脉未剥离)不能确定,故发上来给大家鉴定鉴定。1 @7 \' f3 x$ \* A6 N/ H. M& j
图为200×1 B- p, h: x- b8 ?( n+ W0 m' Z
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作者: sj842563    时间: 2012-10-12 08:41

我也有这种杂细胞,我分离的脐静脉,但是没分离羊膜层,我想应该是上皮细胞
作者: jensn    时间: 2012-10-12 09:53

从图上看,应该是内皮祖细胞占据了大多数,也有梭型的间充质干细胞存在。很能消化下来的我觉得还有可能是成纤维细胞
作者: Roden    时间: 2012-10-12 10:30

上皮样细胞。
/ S3 _5 T) b/ T/ x9 H3 z& g疑似来源于脐带系膜,楼主应该是没有剥离脐带外表层系膜,不过这类细胞生长缓慢不易消化,慢慢就被间充质细胞稀释了。
作者: lazyworm    时间: 2012-10-14 21:37

脐静脉没剥离,可能是内皮细胞,在低倍镜下是不是可以看到这些细胞周围有比较平整的界限,一圆团一圆团的。
作者: huajie881026    时间: 2012-10-14 21:51

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4 F$ l5 E# e( T嗯 是的呢。。。这么说就是内皮细胞洛?
作者: lovesxj941    时间: 2012-10-16 10:58

虽然应用消化法消化脐带,但是也可以尽量选择Wharton's Jelly层。这样MSC分离效率会高。不注意分离的话 很容易出现内皮细胞。
作者: Tim    时间: 2012-10-17 11:50

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内皮细胞养的很好!你可以试着取材的嘶吼弄干净!我一般3条血管都去除了!膜也去除了!养的很好!一条脐带我最多贴壁养2瓶!
作者: 枫之叶影    时间: 2012-10-17 15:34

这个有点像血红红细胞,我们曾经养过脐带间充质干细胞,去掉了2条脐动脉,一条脐静脉,羊膜也去了还是有上面的细胞,但是养一段时间就渐渐没了
作者: deshenglll    时间: 2012-10-26 16:00

是上皮细胞。没事的,贴壁比较牢固,用胰酶消化较难消化下来。所以不必担心。这类细胞在培养瓶上可以看到一圈白色的圈。对间充质细胞生长影响不太大。
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

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1 v( E; B* o: q. ^: |
7 ^* s& ?+ {+ U6 v+ j可否发一份消化方案学习一下?
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

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5 R1 v' d* u, Z, }5 ~0 K可否发一份消化方案学习一下?
作者: lyj-0017    时间: 2017-4-19 18:54

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可否发一份消化方案学习一下?
作者: yanxm920    时间: 2017-5-11 15:50

楼主的细胞应该是上皮细胞污染,这种细胞会影响细胞的纯度,但是传代久了会消失。因为这种上皮细胞很难消化下来,意0.25%胰蛋白酶需要消化10分钟左右,而MSC基本上1分钟内就会被消化下来,但建议做的时候还是去掉血管(3根)和表皮,主要取华通氏胶来培养间充质细胞,望采纳!!
作者: 漾轩    时间: 2017-5-11 17:02

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