干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

标题: 慢病毒,腺病毒和逆转录病毒 [打印本页]

作者: syacr    时间: 2013-10-17 15:52     标题: 慢病毒,腺病毒和逆转录病毒

一直应用逆转录病毒侵染靶细胞,一直没有诱导出iPS细胞,出现了克隆,检测不是。应用脂质体转染,最近想换下病毒试试,是否慢病毒和腺病毒的侵染效率要更高,并且他们之间应该如何做选择,望大家给予帮助
作者: wanglimaomao    时间: 2013-10-18 08:15

转染病毒不需要脂质体吧,腺病毒可以直接转染到细胞里面的。另外,病毒转染有宿主特异性的,不是每种细胞都能转染的,要看你要转染的目的细胞是什么,当然,腺病毒和慢病毒光谱点。
作者: 亮亮燕燕    时间: 2013-10-18 11:39

我转293T细胞,用的是慢病毒,是脂质体转染的哦
作者: syacr    时间: 2013-10-18 17:36

回复 亮亮燕燕 的帖子# @0 `8 M7 M3 C( t9 b" N, ^0 d
9 O! r( `/ J3 v0 D* U
请问您用的什么牌子的转染试剂,能告诉我吗??
作者: murong    时间: 2013-10-19 10:44

逆转录病毒和慢病毒诱导IPSC效率高,腺病毒的效率低,需要重复转染。
作者: murong    时间: 2013-10-19 10:44

逆转录病毒和慢病毒诱导IPSC效率高,腺病毒的效率低,需要重复转染。
作者: kongpzh    时间: 2013-10-19 11:31

回复 syacr 的帖子
4 x8 O9 d  D: V% W. N. r3 O5 [0 X  j: J$ ]% U2 d- A
慢病毒效率还是很高的,可以试试。腺病毒效率也不错,但是不能整合进基因组。根据你的实验目的选择吧
作者: zhouhuaxizhu    时间: 2013-10-19 17:08

转染病毒肯定是需要脂质体的,尤其是原带的细胞。个人觉得慢病毒效率是最高的,毕竟它只要整合到基因组就不会丢失,也就是说一定是一株稳定的克隆了。但是适不适合做IPS我不知道。腺病毒不会嵌合到基因组中这点来说要安全一些。
作者: 漫步云端0511    时间: 2013-10-21 16:08

慢病毒不是可以直接侵染细胞吗?哪一步需要脂质体啊?
作者: zm19900508    时间: 2013-10-22 11:07

慢病毒效率更高哎
作者: tianzhang    时间: 2013-10-25 08:53

有没有人使用过AAV病毒呀?我在思考使用腺相关病毒(AAV)是否可行
作者: 细胞海洋    时间: 2013-10-25 10:02

回复 tianzhang 的帖子* c6 L; ~9 @/ d% {

- k6 k2 v% I/ V' E  Y: S. _4 i' z建议你发新帖提问
作者: tianzhang    时间: 2013-10-25 10:11

回复 细胞海洋 的帖子
; n# K$ a) x# N+ f* |
4 Q( w* Z  r* k& \# `  k好的,谢谢提醒
作者: mio    时间: 2013-10-25 10:22

个人觉得慢病毒更好,HIV反转录病毒去除了致病基因,整合到基因组内,对分裂和不分裂的细胞都有感染能力,因此干细胞也可以,我就是转染的间充质干细胞,ips也可以,选择合适的MOI,转染效率很高,传至20代仍稳定表达,如果对转染率要求高,慢病毒很多可以携带嘌呤霉素抗性基因,转染后用嘌呤霉素刷选,转染率都是90%以上。还有含标记基因GFP、LUC等等,可用于后续试验的标记。还不错。
作者: 亮亮燕燕    时间: 2013-10-28 14:23

回复 syacr 的帖子
. V( x: J" l9 Q5 K% c
& Z: h) S- K1 Rinvitrogen  lipofectamine 2000 reagent




欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://stemcell8.cn./) Powered by Discuz! X1.5