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标题: 有关慢病毒感染后对细胞的鉴定 [打印本页]

作者: wsmcc 时间: 2015-1-21 10:50 标题: 有关慢病毒感染后对细胞的鉴定

我有几个问题想请教大家
1）lentivirus感染细胞，整合的序列是哪部分？是从目的基因载体的LTR到LTR？还是也包含包装质粒部分呢？
2）为什么可以提取被感染细胞的基因组来检测病毒整合情况？是因为目的基因直接整合，不存在内含子的问题么？
3）有的人用RT-PCR来做，是为什么呢？如果提取基因组就可以检测的话。" M! q% B% H) `6 X' W5 P9 C$ ]' c
4）还有一个问题，如果我提取基因组，我的引物可不可以上游是载体序列，下游是基因序列？
/ `" z, H( u) l. `1 c
多谢！; Y) E1 f& Z' j# G

作者: zmfang555 时间: 2016-2-23 15:12

1.lentivirus 其表达载体5'LTR到3‘LTR的序列整合到宿主基因组中成为前病毒基因组，并不含有辅助包装的遗传物质，否则就成了野生型病毒。
2.提取基因组的目的是为了做定性检测病毒基因组是否整合。: j: Q7 @. _ H* P
3.realtime 的目的是检测目的基因在宿主中的表达水平。; c' U! ?2 |2 D& S2 D) l. z s
4.引物设计时你要充分考虑你的引物特异性，既目的基因中选取的片段是否有非特异性结合。

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