在细胞培养冻存时，冻存液中为什么要加入DMSO,它的作用原理是什么？

get0715

DMSO属极性溶剂具有很强的吸水性和对肌体的渗透性，冻存时将细胞中的水分置换出来，水在冷冻时容易形成冰晶，从而对细胞有极大的损伤，而DMSO冷冻时不易形成冰晶，从而有效的保护了细胞。

sunsong7

1. 调节渗透压，降低细胞冰点，减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，2.16%的二甲基亚砜渗透压与人体液相当，10%二甲基亚砜相当于=100ml*1.1/78.1=1400mmol/L% e! }: t7 A+ F7 t5 ~* W5 s
2. 改变细胞膜的通透性，抑制细胞的生长、降低细胞活力、增大细胞膜代谢对产物的通透性。( g+ p: I7 a9 k( L4 |
3. 不良反应：DMSO存在严重的毒性作用，与蛋白质疏水集团发生作用，导致蛋白质变性,具有血管毒性和肝肾毒性.最为常见的为恶心、呕吐、皮疹及在皮肤、和呼出的气体中发出大蒜、洋葱、牡蛎味。

ambassador

回复 12# sunsong7 7 G' O, Q4 @0 ?) k+ W4 U$ O8 y
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    谢谢总结！

chuanbaozang

我们使用的DMSO浓度都是10%+ w. a* Y# y! k3 i  a
冻存前现配并且预冷，因为在较高温度下甚至室温都会有较大毒性。为了更好的保存细胞，我们适当提高下血清浓度

双刀

为了防止细胞在冷冻的时候被冻死。一般冻细胞加10%的DMSO。冻细菌的时候可用甘油。

uyunbilig

我们一般用10%的DMSO，解冻后加有血清的培养液1500转离心5分钟 洗干净上清重新加上新的培养液就可以了。 我用过的几种细胞存活率都很高！

xbs530515

冻存保护剂，一般使用时5-10%

decloud2009

冻存细胞时，我们是10%的DMSO，但是会预先加入一部份DMEM来溶解，因为DMSO溶解的时候会产生热，会把细胞杀死的。。

leestone

回复 10# xus1019
) H4 c: d7 P, S: L6 m/ V! B+ B4 f原來5%就夠了阿～
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我們一般Final concerntration 都是用10%DMSO + 血清或培養液

initiation

DMSO中文名为二甲基亚砜，是一种有机溶剂。当冻存细胞时，细胞受到物理损伤，即细胞内形成较大的冰晶，破坏细胞膜系统，DMSO可以防止大冰晶的形成。达到保护细胞的作用。