免疫荧光二抗用什么稀释？

细胞海洋

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' Q& L9 t( g4 ^, {8 Q建议你发新帖提问

xiaoyurly

回复 请叫我晓白 的帖子8 d& T5 E% B; i& A- M0 \& _* f* H
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染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才换成石蜡，成功率才高了的。
" H" F- B, `! c* T8 p( A我们做的是心脏切片染色，心梗后5天的组织切片，还在炎症反应期间，所以c-kit阳性细胞较多，常规荧光显微镜拍摄。现在用共聚焦的挺多，照片清晰度更高。如果是正常心脏固有的c-kit阳性细胞应该是比较少，你是想染心肌干细胞吗？可能需要大量切片染色，然后耐心找视野
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请叫我晓白

xiaoyurly 发表于 2013-4-17 15:45
. ]( E1 h9 f' K6 X3 x0 h  @! a. B3 h回复 请叫我晓白 的帖子) d  [- o  N* [* [: o

* a7 H2 Q, P0 k" M# }染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才 ...

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是的，是染梗死后固有的c-kit心肌干细胞，没有注射细胞，所以找不出来，根本达不到文献上那种效果。( s8 k) C+ C1 p6 h$ h# B7 ^$ G
真是郁闷。准备再做几次试试。有新问题的话还请您多多指教啊

xiaoyurly

回复 请叫我晓白 的帖子' U8 ?% A4 V5 p9 W* n5 Y
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没问题，祝好运

请叫我晓白

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老师，我又做了一次，请你帮我看看这张图是细胞吗

细胞海洋

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请直接上传论坛

jiaozi

我以前用的是PBS稀释的，不过效果也挺好，是否BSA关系不大

yangcy-smile

我们一般是用5%的血清进行封闭以及一抗和二抗的稀释，效果都挺好的。然后关于一抗稀释比例我们细胞的话用的最高的是1：400，二抗一般是1：1000.组织的话可能要酌情提高比例，但是我觉得要是染表面标记的话，二抗比例不宜很高。个人观点，不对之处，请各位指正。

xiaoyurly

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请叫我晓白

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2013-5-24 14:58 上传

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