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回复 pla269 的帖子
" L, y# R; l! d. C4 k" D& e" X
1 k6 R8 j. a7 S% ?, v0 K我们正常的流程是:& ]* L9 B" K: t: b) u
第一天,下班之前也就是5点钟接菌,37度震荡培养;
1 o* i% V2 c. H K7 J第二天,上班的时候(9点钟)收菌,培养的时间也就是16小时左右。3 B5 F8 D+ q) ]* N7 s: ?; Q
基本上是目测判断菌量的多少,很久没有测定过菌液的OD值,我忘了是0.6-0.8还是多少,你可以自己查一查分子克隆手册。凭着经验,看起来比较浑浊就差不多了,因为我提取质粒一般是用作细胞转染,按照我们以往的实验,都是大致这样的流程,所以没有很细致的去研究这个。
* p8 Z; Y# S O/ r9 E& i0 {摇菌4-5小时的话,在我们这边不大合适,因为这样接下来还得抽提质粒和验证质粒需要花费2-3小时,那样一个工作日就排满了,有可能做不完还得加班。
$ M7 P* F5 N& y我觉得在基础实验这一块,尤其是商品化试剂盒非常成熟的基本实验技术,第一次第二次认真参考实验手册,这样你就会得到自己的判断,如果只是简单的得到质粒作为后续研究使用,你大可不必拘泥于实验手册,毕竟每种菌、每种质粒有自己的特性,怎么方便实验流程怎么来。 |
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