![Rank: 1](static/image/common/star_level1.gif)
- 积分
- 2
- 威望
- 2
- 包包
- 11
|
![干细胞之家微信公众号](data/attachment/common/cf/102633upjfex809ss9e8h0.jpg)
与以往的细胞示踪手段相比,Cre/loxp 系统的
3 E' k) W5 x+ n' N& X标记方式具有良好的靶向性,只会在表达组织特异
# l; ?. z) s7 d性启动子的细胞内发生,很大程度上避免了错误标
8 u) k$ Q- S/ l2 |' S/ q: `记的问题。 此外,Cre/loxp 系统最大的优点是对基 b$ s; A) q, y4 a: _( z
因组进行了修饰,具有遗传特征,发育过程中表达过
+ r6 a# |' l1 F6 h! a8 ]Cre 的细胞以及其后代所有的细胞都会被永久地标* S7 P: J* ^1 P" s$ m6 I
记。然而,这一特点也导致无法对标记时间进行
7 I! N$ C2 h* A! }4 z控制。
: {% O }& f: P |$ r为了解决标记时间特异性的问题,Metzger 等在& [) U6 D. G# e- {: F0 `/ `
Cre/Loxp基础上制作了一种新的小鼠模型[17]
6 z6 \1 Z/ v) n4 }$ k/ r: c,这种3 @+ c0 v4 a2 `. I$ V$ s
模型利用了雌激素受体为核受体的性质,借此调控
: S( b* Q6 I H; L. W2 n* @* A, bCre 入核的时间。 该模型中的 Cre 与经修饰的人类
; k$ ~7 j7 X, v雌激素受体配体结合域融合在一起表达 (Cre-
$ D+ Y5 Q7 [7 Z$ y: C4 |4 oERT
" s# B) q! Q0 @5 g' ^. b# I2 t),该受体不结合雌二醇,对他莫昔芬(tamox-
& q: g( t: B# V8 W) l. I7 Yifen)有亲和性。 在没有他莫西芬的状况下,由于雌- p/ G) ?+ s" N5 C
激素受体停留在细胞质中,导致 Cre 也无法进入细
$ v+ K `% a1 M2 X6 u胞核,只有在外源性他莫西芬的条件下,Cre 才能伴
( r: G- a" [$ M随雌激素受体进入细胞核,实现对Loxp 片段的重组
+ D5 U# Y4 Z1 P% e) t修饰。 因此,只要控制他莫西芬的注射时间就能实
+ _7 h) Q4 h5 M2 I现对敲除事件进行时间上的控制
2 V! X8 U2 x' s2 I2 r' @5 u' ^
- |! [* W; ?6 U! N1 S6 ?; ~2 E——————二楼正解(其他确实太官方了),以上出自一篇中文综述《细胞谱系示踪》,通讯作者陈林 |
-
总评分: 威望 + 2
包包 + 10
查看全部评分
|