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- 积分
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- 威望
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- 包包
- 1921
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b. 诱导多能干细胞传代* }; R1 H1 x# n9 L5 ~; O! E' e
取60-mm培养皿 每个加入3 ml 0.1%明胶溶液,37℃包被30分钟以上。8 L9 R: d" g) C' N7 N$ ^& A# [
吸掉培养基,加入PBS清洗一遍,每个60-mm培养皿中加入1 ml 0.25% Trypsin,37℃孵育2分钟。5 o' T! b2 j6 g' f0 @0 A
加入2 ml DMEM 培养基,用1 ml 枪头轻轻吹打3次,将细胞悬液转移至15-ml 离心管,1200 rpm离心5分钟。/ _- o* \" S7 u: }: y0 x
吸掉上清,用4 ml KOSR-DMEM培养基重悬,转移至明胶包被的60-mm培养皿,37℃,5% CO2培养,让滋养层贴壁40分钟。
! R8 g- j' Z0 _( x- p4 ]6 R% Y将60-mm培养皿中细胞上清转移至15-ml 离心管,1200 rpm离心5分钟。
! h$ o$ O" g& N, {1 o+ e$ F1 H吸掉培养基,用4 ml KOSR-DMEM培养基重悬,按照1:4的比例分至3个铺有滋养层细胞的60-mm培养皿,37℃,5% CO2培养。
# p' V* {7 }1 {( J将就一下吧,我本科的时候写的,基本都对 |
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