中国农大PNAS获得无需外源因子获得iPS细胞

Musing

来自中国农业大学，美国犹他大学等处的研究人员发表了题为“Efficient Germline Transmission Obtained with Trangene-free Induced Pluripotent Stem Cells”的文章，首次获得了高质量的无外源因子的诱导多能干细胞（iPS细胞），这种细胞也能应用于胚胎操作，并且能够产生健康的后代小鼠。7 m1 J( P7 @7 R  i( C- ]
    文章公布在7月7日《美国国家科学院院刊》(PNAS) 杂志上，这项研究由中国农业大学吴森实验室和犹他大学卡佩齐（Capecchi）实验室合作完成。其中吴森教授早年毕业于北京大学，主要研究方向为动物遗传工程及干细胞。) |0 s2 o: m+ o4 g
    多能干细胞(Pluripotent stem cell，Ps)是当前干细胞研究的热点和焦点。它可以分化成体内所有的细胞，进而形成身体的所有组织和器官。因此，多能干细胞的研究不仅具有重要的理论意义，而且在器官再生、修复和疾病治疗方面极具应用价值。但是过去认为多能干细胞只能从人胚胎中获得。2007年，美国和日本科学家发现，应用人和鼠的正常皮肤细胞，导入KLF4、OCT4、SOX2和C-MYC四种基因，即可由正常体细胞转化成多能干细胞。这种基因诱导而产生的多能干细胞称为诱导多能干细胞(iPSC)。( x' C+ Q' H" v* l* U! s
    无疑这种iPS细胞在再生医学领域具有重要的应用价值，但是传统的诱导方法是通过逆转录病毒或者慢病毒载体携带OKSM四因子，使iPS细胞具有潜在的致癌性，从而不能够应用到人类细胞治疗领域。
9 ?+ T+ @0 {5 X' @% T- w) I6 w8 v    为了解决这个问题，在过去的几年里科学家们研发了各种方法，用于诱导产生无外源因子iPS细胞。这些方法包括质粒、piggyBac转座子、蛋白转导、mRNA和microRNA转染等。虽然这些方法能够产生无外源因子的iPS细胞，但是不能够稳定可靠地得到高质量的、具有生殖嵌合能力的细胞。
  M$ P* r# z$ Q( O& j' t6 |" f在最新这篇文章中，研究人员成功地将8个重编程因子和选择性标记基因放到一个非整合质粒中，从而获得了较高质量的非转基因（transgene-free）iPS细胞。这种方法在干细胞研究领域将会有重要的应用。
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" `# G7 B% t1 M    所谓非转基因（transgene-free）iPS细胞，就是指不需要外源重编程因子，就能获得和维持多能性的iPS细胞。要获得这种iPS细胞，对质粒的要求比一般经典的四因子重编程方法要高。
" z3 v3 H6 j: ~2 _$ ?8 V    因此，研究人员优化了重编程因子的组合，挑选了合适的筛选标记，并将这两者整合到一个非整合质粒中。更重要的是，研究人员发现pMaster12质粒能产生非转基因（transgene-free）的iPS细胞，这也就是说这种细胞在2i培养基中生长后，能应用于胚胎操作，并且能够产生健康的后代小鼠。& z6 i# N( _: q: u
    这项研究对于解决iPS细胞中致癌性的问题具有重要的意义，也将有助于解析诱导多能干细胞形成的分子机理。
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细胞海洋

中国农大PNAS：无需外源因子获得iPS细胞（附原文）
) c  C) o3 a4 G6 xhttp://www.stemcell8.cn/thread-81990-1-1.html

varing

这个不能说是无需外源因子的ips，只能说是没有外源OSKM基因插入的ips，在诱导过程中还是需要外源因子的超表达的。小岛芳晴子的酸浴ips（虽然造假了），思路才是无需外源因子的ips产生方法。楼主这标题明显不合格。

saifast00

那么高要求的质粒想要重复出来也有点困难吧，而且同意LS，这个只能说导入的基因会沉默和经典的导入4因子的方法一样，只是这个效率更高而已，并不是真的没有导入外源的东西

varing

回复 saifast00 的帖子7 [% Z2 b& n% _8 s
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有点不准确哦，是导入的质粒episomal vector会在细胞增殖过程中丢失，不是基因沉默。好像他的质粒会提交到addgene上去。