请问胶原酶I型或者V型消化组织需要加血清吗？

angelocream

回复 qinchuanniu 的帖子' C! r& e) t# i! t

. b0 T" }8 `1 w' s5 n: ?, f比如软骨细胞的消化时间是17h以上，有些组织消化时间更久，FBS能起到很好的保护作用，而且在特别的胶原酶的说明书上也有写需要加FBS。关于FBS残留的问题，FDA有一个详细的标准

免疫与细胞

不需要加，我们在做消化时从未加过，如果要终止消化，对胶原酶进行稀释离心去除就可以了。

sfnana

长时间消化的时候最好加一点，可以保护细胞，短时间消化，不需要加。

蒋佳焕

angelocream 发表于 2016-9-28 09:12
! e/ h* @7 d0 D2 c) M胶原酶消化 不会被血清终止，而且血清有保护细胞的作用，所以在原代培养的时候为了保证细胞的生存率，我一般 ...

4 n/ x# f5 j& p$ }谢谢，终于解惑了
( G* ~" Q- W! d& _我也是做原代，用的胶原酶: `! F1 p3 B8 Y! [$ h
师兄师姐都说血清会抑制酶的活性4 M. @/ H0 O# J6 s# _. I2 f
但是不加血清的话长时间消化后细胞活性很差

蒋佳焕

angelocream 发表于 2016-9-28 09:12
" ?! H. x0 |0 R+ ^胶原酶消化 不会被血清终止，而且血清有保护细胞的作用，所以在原代培养的时候为了保证细胞的生存率，我一般 ...

1 B$ H$ {4 j% u! b; j* E学长，不知道你还看不看得到，请问你原代消化的时候还会添加双抗防止污染吗？是1%浓度吗？因为完全培养基也是这个浓度，所有不会对细胞产生太大的影响吧

15558156935

消化过程一般不加双抗，因为双抗消化过程对细胞也是有一定损害，一般在培养过程会加1%双抗

Demon_CN

一般不需要加FBS，如果消化浓度低时间长，隔夜那种，细胞又特别珍贵需要尽可能提高活率，建议还是加，* w! q/ @4 y$ ^# x3 x
细胞消化成单个或者小群体还是需要能量消耗的，有可能会受损。