请教几个初级问题，关于抗体

zhaoyan1983

1、做Western blot时，抗体应该选择单抗还是多抗？9 p  |( D8 _; O/ p' w
2、做免疫组化时的酶标抗体或者荧光素标记的抗体（二抗）应该是单抗还是多抗？
3 {7 S& \; H+ ~$ j+ ]3、与抗原直接反应的抗体（一抗）应该是单抗还是多抗？% H4 i! I( S, i0 g6 U# c: u4 o: f2 _

ljs

第一个问题我没做过，无法回答。
% Q% \# W* Z/ i! ?第二个问题：酶标抗体或者荧光素标记的抗体通常是多抗，但是也有一些情况是单抗，这个会特别提出来。
- m5 z' ], I( z  [第三个问题：一抗是单抗，不用质疑。但是也有一些情况是多抗，这个会特别提出来。因为可能目的是不一样的。
7 L: u* r: o. o5 Q, Z, Y2 g8 `总之一抗是单抗，二抗或三抗是多抗。$ Y% n/ D! n0 m8 F; z
问这个问题有点嘿嘿。你还是多关注其他的问题吧，如抗原修复，减少非特异性染色。这才是你将来遇到的最大的问题。$ `# ?3 W# U; z' ]- {" M, n! X& I. ^

zhangmingqi111

单抗是针对单一的抗原决定簇产生的抗体，它的特异性强，但是效价没有多抗高，而多抗是光谱抗体，它的特异性差，而效价高。% ~" a% I! v! A( L
WERSTION BLOT时，一抗通常用单抗最好，但是有些抗原只有多抗，所以能买到单抗情况下用单抗，买不到再用多抗了。多抗容易产生假阳性，因为有些抗原的抗原决定簇相同，所以易被着色。二抗通常都用的是多抗，无论是酶联的还是荧光的，因为二抗是针对一抗的抗体，它不起到鉴定抗原的作用。总的来说一抗通常是单抗，二抗是多抗。

zhaoyan1983

回复 zhangmingqi111 的帖子
6 c7 c) m6 N' l+ {: F' J  S+ {8 B) Z+ t1 o, w1 o# M" }" E
谢谢你的回答，但是做Western时蛋白质变性可能使抗原决定簇被破坏，如果用单抗的话 会不会不出结果啊？

zhangmingqi111

你说的情况可能会出现，这就需要做预实验，你测出你的抗原决定簇了吗？
) s) D( t# |1 ?9 a

lh_kitty

要看自己的实验目的吧，一般来说单抗要好一点吧，如果要同时检测几个抗原就只能用多抗了
3 e" z9 r1 s  }' w

lanxiubala

最好用单抗，但单抗比较贵，一抗的选择最好是单抗，二抗大部分是多抗吧

hehe100

western blot 时，一抗最好选择单抗，专一性比较好。二抗一般是多抗。如果用SDS-PAGE胶转膜后检测不出来抗原，可以试试用native胶。

guosapphire

个人经验，没必要纠缠于单抗还是多抗，只要好用就霸道！