hiPS传代时的消化问题

stemcellmeng

如果iPS消化的时间比较长还下不来，就有可能是分化了。

573639471

回复 fguw 的帖子
% n; ]* L( r: Q+ f; P. W8 [
; V' E8 m" f- P& l* S' k' l+ q用PBS配的

573639471

回复 zmm 的帖子
0 K5 K; E# J6 T
: H& Q* V( o# [+ S; k! NiPS是人的，feeder 是鼠的

573639471

回复 BNJN 的帖子
* I6 U. r9 W# m3 C8 Y6 G
3 e" |/ I6 }1 K不会吹散吗

573639471

回复 白巧克力 的帖子) I+ _) i, H0 g. ]3 M& W
4 K5 x) ?7 e" c- L2 @
你买的是哪公司的？ 好用吗 用DMEM/F12配的？

BNJN

Gibco的，我实验室的hiPS、hESC传代都用，5min后看见克隆边缘有卷起就行了

白巧克力

回复 573639471 的帖子+ b: T# I/ h- _' N

7 V4 |/ L1 R* I, kGibco的，具体与楼上BNJN相同。

573639471

回复 fguw 的帖子
/ _7 X0 i  J. S+ b( t& s1 x3 R  I* J  w. e; E5 U
配的有什么问题？除了不应该用PBS还有吗

fguw

比较标准的是，DMEM/F12（1：1）, g! D1 X2 f& M9 n8 [7 P
因为基础培养基就是这个，, v; w: [# N5 B* t7 }
我们实验室做过实验，发现这个最好，

也行天下

       feeder太密了！iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧，这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。
# Z7 w; A/ a+ @1 G) Y8 q2 k    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边，即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。" t) k% A0 W1 ~, X2 t2 ]