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楼主: 573639471
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hiPS传代时的消化问题   [复制链接]

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包包
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发表于 2012-6-23 17:12 |只看该作者
如果iPS消化的时间比较长还下不来,就有可能是分化了。
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发表于 2012-6-24 08:49 |只看该作者
回复 fguw 的帖子% E" ?2 a( O7 }! Z0 k

5 ^  {9 v' {0 J, Y5 h用PBS配的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
回复 zmm 的帖子" ~$ M3 p+ b8 F. p7 g: a

2 o+ Q- s6 Q4 Z- x* I2 \, D. hiPS是人的,feeder 是鼠的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
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回复 BNJN 的帖子
8 X4 M$ m5 d( W; W, T6 N! U4 y- A, O$ V4 e
不会吹散吗

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发表于 2012-6-24 08:52 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
' H$ c6 N! y2 W+ i
! E  v4 l2 b+ W! p; i4 c你买的是哪公司的? 好用吗 用DMEM/F12配的?

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发表于 2012-6-25 08:56 |只看该作者
Gibco的,我实验室的hiPS、hESC传代都用,5min后看见克隆边缘有卷起就行了
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发表于 2012-6-26 08:42 |只看该作者
回复 573639471 的帖子( Y5 L# X3 g, d$ ^6 e" E- v
3 h- f! j8 X- O# q
Gibco的,具体与楼上BNJN相同。
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发表于 2012-6-26 14:57 |只看该作者
回复 fguw 的帖子
/ ^6 Q: n2 j% M4 Y. n
/ g; R8 e% [* h. `% ^7 i配的有什么问题?除了不应该用PBS还有吗
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发表于 2012-6-27 15:35 |只看该作者
比较标准的是,DMEM/F12(1:1)  |+ _( q! Y% y. {3 f7 x' C% j
因为基础培养基就是这个,
5 v& k+ Q5 t* a2 f+ I我们实验室做过实验,发现这个最好,
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发表于 2012-8-10 16:16 |只看该作者
       feeder太密了!iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧,这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。
5 Z' u* N7 n/ P5 h  C; e  ^# o    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边,即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。
$ \4 x6 n8 j% `$ }
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