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楼主: 573639471
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hiPS传代时的消化问题   [复制链接]

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包包
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发表于 2012-6-23 17:12 |只看该作者
如果iPS消化的时间比较长还下不来,就有可能是分化了。
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发表于 2012-6-24 08:49 |只看该作者
回复 fguw 的帖子
8 c- y4 J" D8 t- n! m0 I' U( Z' w3 n# T( S
用PBS配的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
回复 zmm 的帖子  J! S( k0 b/ T1 X; [: F( l
" j1 k* o! i- M& g, t& n
iPS是人的,feeder 是鼠的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
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回复 BNJN 的帖子6 S. ^, m* f: W7 R* S: B$ v

. k( m% n! Z( t- \: j6 ~不会吹散吗

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发表于 2012-6-24 08:52 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
& P# l+ A$ H! {+ U8 ^7 T+ Q0 `5 F/ D4 |( \9 E% Z% f! C4 _
你买的是哪公司的? 好用吗 用DMEM/F12配的?

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发表于 2012-6-25 08:56 |只看该作者
Gibco的,我实验室的hiPS、hESC传代都用,5min后看见克隆边缘有卷起就行了
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发表于 2012-6-26 08:42 |只看该作者
回复 573639471 的帖子
" ~5 [6 g2 I) U
) r( F$ i+ G( o' a3 L$ [9 ?( TGibco的,具体与楼上BNJN相同。
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发表于 2012-6-26 14:57 |只看该作者
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' X4 D! U0 n2 V/ U9 n$ B! j7 m9 M# D1 P( Z
配的有什么问题?除了不应该用PBS还有吗
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发表于 2012-6-27 15:35 |只看该作者
比较标准的是,DMEM/F12(1:1), r. S/ Q/ ~! n8 I
因为基础培养基就是这个,9 U5 H; l& v! b+ D3 V' h
我们实验室做过实验,发现这个最好,
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发表于 2012-8-10 16:16 |只看该作者
       feeder太密了!iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧,这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。8 b" |4 k& k6 V$ L
    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边,即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。
5 C& l6 d; g# x" z! j
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