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楼主: 573639471
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hiPS传代时的消化问题   [复制链接]

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包包
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发表于 2012-6-23 17:12 |只看该作者
如果iPS消化的时间比较长还下不来,就有可能是分化了。
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发表于 2012-6-24 08:49 |只看该作者
回复 fguw 的帖子5 a5 n$ L& v3 v% }$ y( b6 c! m' M

4 y( m  y/ O5 p3 E" m& r6 p用PBS配的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
回复 zmm 的帖子
- y' g7 |& T8 [: p6 h& h
* f* u" z9 e/ fiPS是人的,feeder 是鼠的

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发表于 2012-6-24 08:50 |只看该作者
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回复 BNJN 的帖子6 o. v- ]! B$ b: `6 Y
: p% q0 ~5 V( L. N
不会吹散吗

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发表于 2012-6-24 08:52 |只看该作者
回复 白巧克力 的帖子
; z- q" B$ w6 `: F9 i9 U; c
1 j# `# b3 m1 F; g" }你买的是哪公司的? 好用吗 用DMEM/F12配的?

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发表于 2012-6-25 08:56 |只看该作者
Gibco的,我实验室的hiPS、hESC传代都用,5min后看见克隆边缘有卷起就行了
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发表于 2012-6-26 08:42 |只看该作者
回复 573639471 的帖子1 D, l* H/ [1 d( o  S: q" F( H
& `9 c2 `0 E( M4 I7 H) o9 u: P, i
Gibco的,具体与楼上BNJN相同。
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发表于 2012-6-26 14:57 |只看该作者
回复 fguw 的帖子
) O- w& l/ G3 V8 r" X9 Y
3 Y7 c4 _9 i$ ?0 L0 {9 s配的有什么问题?除了不应该用PBS还有吗
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发表于 2012-6-27 15:35 |只看该作者
比较标准的是,DMEM/F12(1:1)
  g" ^1 u* K3 m8 X9 O& \& C因为基础培养基就是这个," b' }+ a2 ?" B$ b/ V& b3 J& {6 ?
我们实验室做过实验,发现这个最好,
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发表于 2012-8-10 16:16 |只看该作者
       feeder太密了!iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧,这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。& z9 H# M4 x, l% A1 A" @& B' z( n! K
    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边,即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。5 Y6 P+ Z3 t2 Y/ G6 S0 d8 a
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