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huajie881026

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楼主

发表于 2012-12-9 23:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

间充质干细胞成软骨诱导分化用阿里新兰染色一定能说明诱导成功吗？如下图是我从Gibco的细胞培养手册里截下来的图，这样一个细胞团用阿里新兰染色就能够证明成软骨了？？？

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金话筒帅哥研究员博览群书优秀版主

沙发

发表于 2012-12-10 10:29 |只看该作者

回复 huajie881026 的帖子$ Z) m- C, |& Z3 |. W
# i% o: O* L: b# V+ p8 W
一般是这样的，你要是觉得不放心也可以用RT-PCR进行验证，软骨分化的特异性基因很多。! L+ F/ ~3 f1 {! i- j
不过个人觉得间充质分化最难的一个就是软骨分化。

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huajie881026

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藤椅

发表于 2012-12-13 11:54 |只看该作者

回复 realinter 的帖子

那你觉得我这如何？？？

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myx142

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板凳

发表于 2014-3-25 22:22 |只看该作者

回复 huajie881026 的帖子  k+ Y& l$ p4 ^4 p* ?% r

请问你是否也是做软骨诱导？你的软骨细胞团块是石蜡包埋吗？是以下的步骤吗？0 y& `& H% U) f$ [: o2 Z
1、福尔马林固定。" L" @$ G& f# Q$ `- t
2、脱水：50% 乙醇（90min）→70% 乙醇（90min）→85%乙醇(90min) →95%乙醇(90min)→100%乙醇(60min)→100%乙醇(60min)。
3、透明：1/2乙醇＋1/2二甲苯 → 二甲苯 → 二甲苯，每步60min。& J) H3 l, U  w; x9 V
4、渗透： 1/2二甲苯＋1/2石蜡(90min)→石蜡I (120min)→石蜡II(120min),62℃。
5、包埋：将组织放入盛有石蜡的模具中，摆好位置，于石蜡包埋机的冷台上冷却。# `! t1 P  s9 C8 k3 _- e$ I
6、切片、贴片。
我查的有的说梯度蔗糖脱水呢？和乙醇脱水有区别吗？谢谢！