免疫荧光二抗用什么稀释？

细胞海洋

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xiaoyurly

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; N5 f5 P* }" ?" \4 C& u; g# x染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才换成石蜡，成功率才高了的。! B  ]8 k* l1 _
我们做的是心脏切片染色，心梗后5天的组织切片，还在炎症反应期间，所以c-kit阳性细胞较多，常规荧光显微镜拍摄。现在用共聚焦的挺多，照片清晰度更高。如果是正常心脏固有的c-kit阳性细胞应该是比较少，你是想染心肌干细胞吗？可能需要大量切片染色，然后耐心找视野
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请叫我晓白

xiaoyurly 发表于 2013-4-17 15:45
0 c7 @3 \/ ~; `9 R$ k回复 请叫我晓白 的帖子
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9 E: o. H& {) ^$ L染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才 ...

" }4 n4 F* J% l# |
是的，是染梗死后固有的c-kit心肌干细胞，没有注射细胞，所以找不出来，根本达不到文献上那种效果。
3 ^) C; C5 N1 s. O真是郁闷。准备再做几次试试。有新问题的话还请您多多指教啊

xiaoyurly

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# a' S9 r, N3 P, F
没问题，祝好运

请叫我晓白

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0 K' u% }2 b' i) H

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! z# W7 W3 J, R老师，我又做了一次，请你帮我看看这张图是细胞吗

细胞海洋

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3 \0 }- M4 p1 N) ~8 S( {6 K5 I8 m  p! _! J; M$ f: h* x" t9 T
请直接上传论坛

jiaozi

我以前用的是PBS稀释的，不过效果也挺好，是否BSA关系不大

yangcy-smile

我们一般是用5%的血清进行封闭以及一抗和二抗的稀释，效果都挺好的。然后关于一抗稀释比例我们细胞的话用的最高的是1：400，二抗一般是1：1000.组织的话可能要酌情提高比例，但是我觉得要是染表面标记的话，二抗比例不宜很高。个人观点，不对之处，请各位指正。

xiaoyurly

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1 f+ e/ f# g1 E' {6 U9 F. h% X我看不到图片
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请叫我晓白

回复 xiaoyurly 的帖子. r$ o! ~4 k: B+ z" O& X

9 k2 Y* I4 a, p$ [, F9 L: O" @

2013-5-24 14:58 上传

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