免疫荧光二抗用什么稀释？

细胞海洋

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xiaoyurly

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染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才换成石蜡，成功率才高了的。
6 {  p  g: Z, k. N我们做的是心脏切片染色，心梗后5天的组织切片，还在炎症反应期间，所以c-kit阳性细胞较多，常规荧光显微镜拍摄。现在用共聚焦的挺多，照片清晰度更高。如果是正常心脏固有的c-kit阳性细胞应该是比较少，你是想染心肌干细胞吗？可能需要大量切片染色，然后耐心找视野
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请叫我晓白

xiaoyurly 发表于 2013-4-17 15:45 1 f! Z. l5 W& U4 D; \8 O. a
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! n6 _: g; c! h( W, Z染冰冻的确实少，但是抗体说明书上明确表示可以用于冰冻切片染色，我们染不出来才 ...

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是的，是染梗死后固有的c-kit心肌干细胞，没有注射细胞，所以找不出来，根本达不到文献上那种效果。  S+ N: l" c) V. k7 h, q
真是郁闷。准备再做几次试试。有新问题的话还请您多多指教啊

xiaoyurly

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6 l% I( M: C0 ]# K8 v4 I# k
没问题，祝好运

请叫我晓白

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老师，我又做了一次，请你帮我看看这张图是细胞吗

细胞海洋

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请直接上传论坛

jiaozi

我以前用的是PBS稀释的，不过效果也挺好，是否BSA关系不大

yangcy-smile

我们一般是用5%的血清进行封闭以及一抗和二抗的稀释，效果都挺好的。然后关于一抗稀释比例我们细胞的话用的最高的是1：400，二抗一般是1：1000.组织的话可能要酌情提高比例，但是我觉得要是染表面标记的话，二抗比例不宜很高。个人观点，不对之处，请各位指正。

xiaoyurly

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# u  E% q6 }( p# _  K我看不到图片2 u0 ^- p  {- m! P3 b1 F9 \

请叫我晓白

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) A  P0 ?% N5 [# O, ]" j: `. `& W. w$ @( Y$ h0 K; u

2013-5-24 14:58 上传

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