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标题: 关于红细胞裂解液 [打印本页]

作者: 猩猩    时间: 2013-1-23 09:28     标题: 关于红细胞裂解液

用红细胞裂解液裂解红细胞,并没有出现红色透明的现象,是什么原因呢???每次做裂解时,都是当时将裂解液从4度冰箱拿出,请问温度对裂解效果有影响吗???请教各位大侠们!!!!
作者: dudumao17    时间: 2013-1-23 09:54

可能原因:1,可能裂解液加的量不够,我做过5滴血加700ul,或者200ul加 1ml裂解液的。1 V/ a  _6 {/ {2 q" V& s: u
2,可能裂解时间不够,延长时间试试。& H8 x2 m7 O& p2 s- R0 g" |, i7 }' S

作者: lyj-0017    时间: 2013-1-23 10:06

回复 猩猩 的帖子: K. j# g; k) \9 ^- h4 V) ]
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最好是平衡至室温再进行裂解吧,或者加入后放在水浴中也行
作者: yinfuhua    时间: 2013-1-23 10:46

回复 猩猩 的帖子$ [2 _/ ^* s5 G: z

$ u! X' F( h2 I" y( t% A注意裂解液浓度、加入的量及裂解时间。裂解液用前要放至室温。这些注意了就成了。你自己可以摸索下,哪种条件下裂解更好。
作者: gengtongyu521    时间: 2013-1-23 10:48

1×的红细胞裂解液,在4度冰箱裂解,效果应该好一些。细胞在裂解过程中,会有一部分细胞沉淀,以至于红细胞不能充分接触裂解液,放置一段时间后,记得重新将悬液混匀一次。
作者: jiguojie87    时间: 2013-1-23 11:05

你裂解的红细胞量是多少?加的裂解液的量是多少?裂解时间是多少?我裂解的时候红细胞量大概是10的9次方左右,加3-5ml裂解液裂解30s左右。
作者: 猩猩    时间: 2013-1-23 11:29

回复 dudumao17 的帖子
) [) n! V' y/ X+ n( p7 s: F2 ~
谢谢哦,我会试试的
作者: 猩猩    时间: 2013-1-23 11:30

回复 jiguojie87 的帖子
6 a  n: N: E4 r( x6 H  V3 S! i' L! A4 J/ S5 B8 [  W
非常感谢!!我会试试的
作者: catheryne    时间: 2013-10-3 16:22

回复 jiguojie87 的帖子
' I: L& F% z8 Y& Z4 s2 o- \
( A; ?! H; [7 D; j红细胞的量是10的9次方,还是总细胞数?7 `$ O8 X7 k( `
另外是裂解时间是30s吗?我们一般都会裂解10min以上啊,请教!
作者: jiguojie87    时间: 2013-10-15 11:16

回复 catheryne 的帖子& h7 L1 D" k7 y3 ?: _2 ^

' |0 g1 g4 a5 V# H4 r% D. \% A/ t30s左右。裂解时间太长会把其他细胞裂解掉,尤其是自己需要的细胞。这样岂不是得不偿失。: {0 Q; J/ E6 z9 C; \

作者: catheryne    时间: 2013-10-16 12:22

本帖最后由 catheryne 于 2013-10-16 12:23 编辑
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" y9 q# w7 W% w/ K回复 jiguojie87 的帖子
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翻看了我们这里临床流式检测的标准protocol,也咨询了BD公司的技术咨询,全血标本加入溶血素后,室温放置10min,混匀2次。溶血素用前从10X储存液稀释为1X工作液,平衡至室温。
9 M5 i1 V$ [$ Z/ N) G) O据我的经验,30秒应该打不到裂解红细胞的目的。
  L; v, E1 T4 E而且商品化的红细胞裂解液(我们用的是BD的)对白细胞等其他有核细胞的影响是很小的。
作者: baicaikua    时间: 2013-11-13 15:35

有时候要求不高我们直接用蒸馏水裂解,利用渗透压,涨破红细胞膜。
作者: xupanglian    时间: 2013-12-4 19:10

很有可能你配的裂红液有问题,我一般是配好10*的放4度保存,新鲜配置至1*使用,实际使用冰上裂红与室温裂红都是可以的。只有做特殊实验才在冰上裂红的




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