干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站
标题:
关于红细胞裂解液
[打印本页]
作者:
猩猩
时间:
2013-1-23 09:28
标题:
关于红细胞裂解液
用红细胞裂解液裂解红细胞,并没有出现红色透明的现象,是什么原因呢???每次做裂解时,都是当时将裂解液从4度冰箱拿出,请问温度对裂解效果有影响吗???请教各位大侠们!!!!
作者:
dudumao17
时间:
2013-1-23 09:54
可能原因:1,可能裂解液加的量不够,我做过5滴血加700ul,或者200ul加 1ml裂解液的。
1 V/ a _6 {/ {2 q" V& s: u
2,可能裂解时间不够,延长时间试试。
& H8 x2 m7 O& p2 s- R0 g" |, i7 }' S
作者:
lyj-0017
时间:
2013-1-23 10:06
回复
猩猩
的帖子
: K. j# g; k) \9 ^- h4 V) ]
% q8 {0 J$ v) L# x3 F
最好是平衡至室温再进行裂解吧,或者加入后放在水浴中也行
作者:
yinfuhua
时间:
2013-1-23 10:46
回复
猩猩
的帖子
$ [2 _/ ^* s5 G: z
$ u! X' F( h2 I" y( t% A
注意裂解液浓度、加入的量及裂解时间。裂解液用前要放至室温。这些注意了就成了。你自己可以摸索下,哪种条件下裂解更好。
作者:
gengtongyu521
时间:
2013-1-23 10:48
1×的红细胞裂解液,在4度冰箱裂解,效果应该好一些。细胞在裂解过程中,会有一部分细胞沉淀,以至于红细胞不能充分接触裂解液,放置一段时间后,记得重新将悬液混匀一次。
作者:
jiguojie87
时间:
2013-1-23 11:05
你裂解的红细胞量是多少?加的裂解液的量是多少?裂解时间是多少?我裂解的时候红细胞量大概是10的9次方左右,加3-5ml裂解液裂解30s左右。
作者:
猩猩
时间:
2013-1-23 11:29
回复
dudumao17
的帖子
) [) n! V' y/ X
+ n( p7 s: F2 ~
谢谢哦,我会试试的
作者:
猩猩
时间:
2013-1-23 11:30
回复
jiguojie87
的帖子
6 a n: N: E4 r( x6 H V3 S! i
' L! A4 J/ S5 B8 [ W
非常感谢!!我会试试的
作者:
catheryne
时间:
2013-10-3 16:22
回复
jiguojie87
的帖子
' I: L& F% z8 Y& Z4 s2 o- \
( A; ?! H; [7 D; j
红细胞的量是10的9次方,还是总细胞数?
7 `$ O8 X7 k( `
另外是裂解时间是30s吗?我们一般都会裂解10min以上啊,请教!
作者:
jiguojie87
时间:
2013-10-15 11:16
回复
catheryne
的帖子
& h7 L1 D" k7 y3 ?: _2 ^
' |0 g1 g4 a5 V# H4 r% D. \% A/ t
30s左右。裂解时间太长会把其他细胞裂解掉,尤其是自己需要的细胞。这样岂不是得不偿失。
: {0 Q; J/ E6 z9 C; \
作者:
catheryne
时间:
2013-10-16 12:22
本帖最后由 catheryne 于 2013-10-16 12:23 编辑
0 p7 e( k& O* b- x- \9 L
" y9 q# w7 W% w/ K
回复
jiguojie87
的帖子
$ L0 [/ Y0 `' Z# A* c
3 _( O/ K6 \9 z" p& z0 b
翻看了我们这里临床流式检测的标准protocol,也咨询了BD公司的技术咨询,全血标本加入溶血素后,室温放置10min,混匀2次。溶血素用前从10X储存液稀释为1X工作液,平衡至室温。
9 M5 i1 V$ [$ Z/ N) G) O
据我的经验,30秒应该打不到裂解红细胞的目的。
L; v, E1 T4 E
而且商品化的红细胞裂解液(我们用的是BD的)对白细胞等其他有核细胞的影响是很小的。
作者:
baicaikua
时间:
2013-11-13 15:35
有时候要求不高我们直接用蒸馏水裂解,利用渗透压,涨破红细胞膜。
作者:
xupanglian
时间:
2013-12-4 19:10
很有可能你配的裂红液有问题,我一般是配好10*的放4度保存,新鲜配置至1*使用,实际使用冰上裂红与室温裂红都是可以的。只有做特殊实验才在冰上裂红的
欢迎光临 干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 (http://stemcell8.cn./)
Powered by Discuz! X1.5