请问脐带间充质干细胞为什么没有细胞爬出？

zsykdx

用组织块培养法原代分离脐带间充质干细胞，但是最近偶尔会出现没有细胞爬出的情况，请问一下这种情况出现的原因是什么？可以解决吗？谢谢。

yooung

1.估计与脐带的质量有关系：1是足月龄婴儿的脐带，还是早产婴儿的脐带？2.脐带的运输温控和保存介质.3.从剪下脐带到处理脐带的时间长短？8 @9 a6 E9 n" |2 q% y# F, z6 n
2.SOP：每次组织法培养的操作是否严格按照SOP完成的。/ U- C4 E$ s' L
3.培养基批间差：有时不同的批次培养的效果不同。# K% s5 Y5 d+ ]
我能想的可能性就这些了。

shellyanlanlan

培养多久了，我们是一周左右的时间才有细胞爬出

游遍芳丛pine

这种情况是有的，操作没有问题的前提下，脐带本身的质量很重要：% {; n8 R! S% Y7 c
1、脐带的保存条件要适当，一般采用等渗溶液加双抗，4℃保存；4 G: I; g: c, n( M2 x  j  c/ Y
2、时间不宜过长，36h内比较好。0 L' \) |4 y% y

jddakui

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* T9 n/ W" R1 u/ v: s36小时，组织块培养会有影响吗？你们有做过TEST吗？

王苍金

原代多长时间了，一般一周左右细胞爬出，由于个体差异，也有十一二天才爬出细胞的，看着换液就好。但是要确定没有污染，组织块禁止频繁移动。

游遍芳丛pine

回复 jddakui 的帖子8 E: J2 P. ~! v( @) L* M
9 @" {0 Z2 J: _
按道理36小时健康的脐带是没有什么问题的，我们做过时间最久的脐带是48h左右的，大概10天左右也可以正常爬出来。如果脐带保存条件没有问题，可以考虑是脐带本身的问题了。这种情况还是有的，所以必须是由正规渠道获得的健康脐带。

jddakui

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6 @6 B0 J/ J/ D
5 y0 ?) W' q, K* s7 A  x加双抗的PBS或者生理盐水都可以吗？需要特殊保存液吗？

游遍芳丛pine

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5 O; T1 T* v; d& T/ ]! y我们使用DMEM

jenny114402

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1 X0 L& ]6 F, l: r% L3 J7 X( e+ S: G
# i3 h- ~9 e! P- a* Z/ Z5 S. M6 H5 |我们一般2-4h，最多也就过夜，然后脐带看起来就不那么饱满。