如何去除培养胚胎干细胞里面已经分化的细胞

Helena110

大家好！ 由于最近培养的细胞很多都分化了，在传代的过程中有没有好的方法可以把这些已经分化的细胞去除掉呢  请赐教了 多谢。

dianying

回复 Helena110 的帖子( D7 E4 _5 T9 o, k% E5 `2 Q8 V

/ d- L) w+ _6 \& N1 u! w+ N 先在显微镜下用 20ul tip 铲掉，吸干旧液，再换上新液，或传代或接着养。

song58

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3 I/ U! Y9 {9 n6 W+ y* _! P
5 `! Q" b- X" q3 T镜下标记不要的克隆，200的枪头调到20，边挑边吸走不要的克隆，都挑完后拿DF12或PBS涮2～3次，换上新鲜培养基就OK了。

YYQ6301

学习了

yangel

如果是人的胚胎干细胞的话，可以直接挑传形态好的克隆。另外，有个粗暴的办法，dispase处理10min，好的克隆会圈边，轻轻一拍就下来了。分化的细胞克隆还贴的牢牢的。

Helena110

回复 dianying 的帖子8 c! X* n8 _2 O6 J) U# \6 D
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谢谢

Helena110

回复 song58 的帖子& s6 ]+ d6 o1 q4 J( @, v6 L0 j
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谢谢

Helena110

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' H; S& e$ s. v" i2 G  s* S# r6 C8 I$ X  q9 z$ L. F% L/ N2 p
是不是分化了的细胞 都消化的慢些呢

Helena110

回复 yangel 的帖子2 f/ T# U$ ~" j+ C
: d3 q$ A0 B# G
小鼠的ES是不是也是这样 谢谢
! w! p1 R# D; o2 f* S

redmaple

你得看看你的干细胞和什么抗性基因相连，我们实验室用得细胞是nanog和抗puromycin基因在同一个阅读框架下，所以我们用puro筛选，分化的细胞nanog表达降低，puro 抗性降低，在高浓度的puro处理下，经过几代培养，分化的细胞就会杀死。你们的ES细胞是不是也是这样。