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楼主

发表于 2013-10-2 11:08 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

测序结果少了75bp是怎么回事啊，用的载体上的引物，正向没有问题，反向测序结果在中间少了75bp。

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沙发

发表于 2013-10-2 14:51 |只看该作者

一般来说正反应该没有这么悬殊的差别

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藤椅

发表于 2013-10-3 00:19 |只看该作者

这个还真是罕见，还是在中间。。一般来说测序某段距离之后就不准了，所以双向重合就可以，但这个中间少真是不知道，如果结果很重要重测一下看看吧。

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板凳

发表于 2013-10-5 23:26 |只看该作者

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关键是你的质粒是什么样的，你确定不是质粒本身的问题？

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报纸

发表于 2013-10-6 21:35 |只看该作者

测序结果的前80以及最后80bp是不准确的，一次测序一般只能保证800bp序列的准确性。如果你少的75bp是在800bp之间，估计是你连接的片段本身就缺失75bp。

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地板

发表于 2013-10-8 01:14 |只看该作者

测序结果是否可信可以看峰图，一般800bp以后峰图十分杂乱就不能信了。如果正向没问题，反向少了，可能反向测序有问题，可以再测一次，或者你用酶切鉴定一下。

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7楼

发表于 2013-10-9 14:00 |只看该作者

一般测序最大也就到800bp，不知道你少的是哪里？正向没有问题的话可以重新测一次反向。测序公司有时候也会因为仪器原因出错的。。

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