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关于IPS 细胞的饲养层 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2010-11-13 20:13 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
大家好,我有一个问题想请教一下,就是关于IPS细胞的饲养层,诱导IPS细胞是不是可以用ICR品系小鼠的胚胎成纤维细胞,看文献上说是要用孕13天的孕鼠,我的问题就是这个天数是严格的13天还是大约的天数就行,为什么要用孕13天的胚胎成纤维细胞,这个还有什么说法吗,期待解答!谢谢!
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沙发
发表于 2010-11-14 14:56 |只看该作者
他用的是13.5天的胎鼠,现在来说小鼠胚胎干细胞比较成熟用的都是这个饲养层。这个时期的胎鼠做出来的饲养层生长状态比较好,能够很好的支持干细胞的生长。要是用其他天数的就没有这么好的生长力了。
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藤椅
发表于 2010-11-14 16:53 |只看该作者
人EG细胞分离_培养及其定向诱导为造血细胞的实验研究,在中国知网能搜到这篇文献,你先看一下不错的,希望能帮的到你
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金话筒 优秀会员

板凳
发表于 2010-11-15 10:42 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
好的,谢谢大家的帮助,我查一下

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报纸
发表于 2010-11-16 12:17 |只看该作者
12.5-13.5天的都行。往前的话胚胎太小没法操作,往后胚胎太大,发育出来的杂细胞更多了。不过做MEF还是可以,我们用15,6天的做过,有点不好的地方就是以后传代能力减弱,基本上第三代就不增殖了。
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地板
发表于 2010-11-16 12:41 |只看该作者
我们一般是用13.5天的胚鼠做的MEF经丝裂霉素C处理后用来做干细胞的饲养层的;太小的胚鼠小,不好做;太大的胚鼠杂七杂八细胞太多了,也不好做的。
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发表于 2010-11-22 10:59 |只看该作者
请问该如何培养iPS细胞?我一点都不懂,谢谢了

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发表于 2010-11-22 21:54 |只看该作者
和培养ES一样,建议你先养一下R1
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发表于 2010-11-24 15:25 |只看该作者
13天小鼠胚胎内大小合适,而且细胞生长状态好,因此都用做。一般处理就是辐射 或丝裂霉素处理.5 W2 F) v2 W& {: Q' w1 X& K
但是 目前研究很多feeder替代物,而且有人源的feeder
9 x% P& k% x, u: ~9 I7 [7 D最新的建议关注下:)7 w( c" [. u5 L% ]
强烈推荐看看应其龙 BMP4,代替血清和feeder就是他和他老板做的(smith超级大牛 胚胎干细胞领域)包括最早LIF就是他老板研究发现的:)
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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-12-15 05:36 |只看该作者
谢谢大家的帮助和回答!
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