请教几个初级问题，关于抗体

zhaoyan1983

1、做Western blot时，抗体应该选择单抗还是多抗？5 Y' p+ f" K4 \5 {
2、做免疫组化时的酶标抗体或者荧光素标记的抗体（二抗）应该是单抗还是多抗？- k: Y! E+ |8 G6 }/ n  q
3、与抗原直接反应的抗体（一抗）应该是单抗还是多抗？
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ljs

第一个问题我没做过，无法回答。: @3 i. A2 h9 j1 B
第二个问题：酶标抗体或者荧光素标记的抗体通常是多抗，但是也有一些情况是单抗，这个会特别提出来。' v4 g- l+ _+ o* C6 @
第三个问题：一抗是单抗，不用质疑。但是也有一些情况是多抗，这个会特别提出来。因为可能目的是不一样的。9 ^2 L) X3 F. a1 e; P  ~1 \
总之一抗是单抗，二抗或三抗是多抗。9 @' X* F+ ?2 |! g" ~" |, u
问这个问题有点嘿嘿。你还是多关注其他的问题吧，如抗原修复，减少非特异性染色。这才是你将来遇到的最大的问题。
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zhangmingqi111

单抗是针对单一的抗原决定簇产生的抗体，它的特异性强，但是效价没有多抗高，而多抗是光谱抗体，它的特异性差，而效价高。; X+ g3 \% d% T
WERSTION BLOT时，一抗通常用单抗最好，但是有些抗原只有多抗，所以能买到单抗情况下用单抗，买不到再用多抗了。多抗容易产生假阳性，因为有些抗原的抗原决定簇相同，所以易被着色。二抗通常都用的是多抗，无论是酶联的还是荧光的，因为二抗是针对一抗的抗体，它不起到鉴定抗原的作用。总的来说一抗通常是单抗，二抗是多抗。

zhaoyan1983

回复 zhangmingqi111 的帖子$ Z" k$ [. P% r7 q! E7 e( f: y
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谢谢你的回答，但是做Western时蛋白质变性可能使抗原决定簇被破坏，如果用单抗的话 会不会不出结果啊？

zhangmingqi111

你说的情况可能会出现，这就需要做预实验，你测出你的抗原决定簇了吗？
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lh_kitty

要看自己的实验目的吧，一般来说单抗要好一点吧，如果要同时检测几个抗原就只能用多抗了
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lanxiubala

最好用单抗，但单抗比较贵，一抗的选择最好是单抗，二抗大部分是多抗吧

hehe100

western blot 时，一抗最好选择单抗，专一性比较好。二抗一般是多抗。如果用SDS-PAGE胶转膜后检测不出来抗原，可以试试用native胶。

guosapphire

个人经验，没必要纠缠于单抗还是多抗，只要好用就霸道！