新人求教

leehomaxun

本人刚开始做干细胞，一切从零开始。
  e2 Q) C( y- _' `现在正准备开始养ESC和iPSC，有一下几个疑问请大侠们指教。! ~& r/ p* V% ~7 L. T2 R  |
1. 我们实验室ESC和iPSC是和MEF coculture，那么复苏的ESC或iPSC是直接复苏到已经准备好的MEF上呢？还是先单独培养？
( o$ t$ d4 {% J2. 如果是单独培养的话，培养板是否需要特殊处理？- X! `7 s+ z; ]" n: f! @2 @, m
: q1 Z& R/ s3 O% y; R
谢谢了！

歪歪

既然是共培养为啥要分开呢？

leehomaxun

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5 }3 i* e4 Z* ^, }: C1 ]; V6 Z+ l$ s
因为看到的文献里是这么说的：将板子上长好的ESC或iPSC transfer到MEF上去，而我现在手头上没有ESC，需要复苏，我的问题是将ESC直接复苏到MEF上吗？

song58

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) R. N3 n) d9 y7 y. h+ l( L/ }2 Y$ q  j, j3 S
对，就该这么办。
2 \( v: W% v/ l$ P. Y你说的human ES吧？0 Q- Q7 x- h+ i
注意，feeder先用DF12或者PBS洗3次，接入预热的hESM。15ml离心管中先装1～2ml预热的hESM，把解冻的ES轻柔的移入其中。离心后弃上清，用预热的hESM重悬，接到dish里，OK了。尽量不要把ES吹的太碎了，1ml的枪吹吸一下就足够了。