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关于细胞不贴壁的问题   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-6-13 15:26 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
最近有一批细胞,在培养的五天后,无细胞爬出,在第一次换液后,细胞基本呈漂浮状态,培养基无浑浊、变黄现象,后来怀疑是支原体污染,我试着用其他传过代的细胞加入此培养瓶中,细胞贴壁正常,我迷惑了,这到底是什么原因导致细胞漂浮的???请教各位大侠!!!!
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沙发
发表于 2013-6-13 16:28 |只看该作者
应该是你之前接种的细胞状态不好,或者培养基不太适合这种细胞
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藤椅
发表于 2013-6-13 16:38 |只看该作者
回复 猩猩 的帖子
( e3 }1 N4 M; T+ e6 a6 T1 ^9 D
# Y7 x# F! {$ H能否说的详细一些,是原代培养还是传代培养,是否有什么试剂耗材等在培养中更改过,培养条件,培养方式等是否有变化?
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板凳
发表于 2013-6-13 20:24 |只看该作者
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根据你说的无细胞爬出,推测你做的是原代提取,那你的培养基条件是不是适合你说培养的细胞呢?
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报纸
发表于 2013-6-13 22:04 |只看该作者
交代的不太清楚。根据你说的“爬出”推测应该是组织块贴壁培养原代细胞?可能的原因:组织块贴壁不紧;组织块消毒处理的消毒剂或PBS没有漂洗干净;培养基不合适。如果是培养脐带MSCs即使有不太严重的污染也不容易发现的(经验认为)。
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地板
发表于 2013-6-14 11:48 |只看该作者
那要看是什么类型的细胞了,某些细胞,如293T,293FT贴壁都不牢的。
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发表于 2013-6-17 13:59 |只看该作者
回复 SKC-SFC 的帖子) N! @& @' @! q
% Q- q% s$ B; q$ C
我们实验室一直用的是这种培养基,没出过问题,就最近有两批细胞呈漂浮状态

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发表于 2013-6-17 14:00 |只看该作者
回复 lele 的帖子
# y9 w  P- \( m/ t! [2 W3 w; ]9 U& u
是原代培养,所有的试剂耗材都没有更换过,所以才不知道是什么原因导致的

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发表于 2013-6-17 14:01 |只看该作者
回复 mjc588 的帖子0 Z, f& F* s/ N5 S, m
+ w: A" h2 G  |& i# M* F
没有啊,其他细胞都生长的好好的,非常正常,就最近这两批有问题

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发表于 2013-6-17 14:03 |只看该作者
回复 zsc78 的帖子
- D5 m: T$ S) n. R3 o
. \: {: {* G& D. s7 v做的是从胎盘种提取的间充质干细胞,是原代时发生的问题,操作步骤和平常一样,所以不知道是什么原因导致的
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