如何去除ESs中的feeder layer cells？

jn808

在制备拟胚体（EBs）时，ESs中混有的feeder layer cells会影响EBs的质量，敢问专家有什么好的方法去除ESs中的feeder layer cells呢？这个问题困扰很久了一直很难有效解决，特此咨询！

wxyWXY

差速贴壁也会损失很多es细胞吧  每次吸走上清后 在显微镜下看  都有很多es细胞残留   稍微吹打后mef也跟着下来了  我是每次贴壁20分钟  没有铺明胶  很心疼es细胞啊

meiying3061

我也是差速贴壁，但是不铺明胶的，有差别吗？
$ Q8 ]# T- E: \0 W. w0 F我基本上是20分钟一次，贴2次，感觉除掉有85%的样子

dongxin

回复 jn808 的帖子2 p: _: J  Q* e0 G7 U8 M

1 e- E6 J2 O: f8 u! T可以尝试用机械挑传的方法，将ES团块接种在petri dish上。供参考，祝好运！

tangyvhuang

学习一下

majing217

消化之前，在接种的那个皿里铺上明胶，如果还有饲养层，就半个小时后继续铺在有明胶的皿中。

yangpan521

胰酶消化后接种在国产皿里，细胞基本都呈现悬浮生长，有饲养层的会继续贴壁，贴壁时会带着部分的ES细胞，几个小时后换液，将所有的培养液都吸入离心管内，自然沉降5分钟后，将上面的悬液再放入皿里，重复几次，饲养层基本上都换掉了

amberma

差速贴壁  贴两次明胶  基本上就能除掉

starlight

我们也是用差速贴壁法，

jn808

回复 sapery279 的帖子: g$ \5 R- n" @  @1 u. u* w- l8 |9 C

- k) I( Q0 q, b+ o2 w9 y- Q, u. q' {感谢大家的建议，这些方法我也试过。缺失很难完全去除feeder。希望会有更好的去除feeder方法。无feeder layer 确实很好，但是成本好高啊