请问胶原酶I型或者V型消化组织需要加血清吗？

angelocream

回复 qinchuanniu 的帖子$ g8 Y( r; i' k% y8 q9 G3 U

# `5 f! q- B1 a比如软骨细胞的消化时间是17h以上，有些组织消化时间更久，FBS能起到很好的保护作用，而且在特别的胶原酶的说明书上也有写需要加FBS。关于FBS残留的问题，FDA有一个详细的标准

免疫与细胞

不需要加，我们在做消化时从未加过，如果要终止消化，对胶原酶进行稀释离心去除就可以了。

sfnana

长时间消化的时候最好加一点，可以保护细胞，短时间消化，不需要加。

蒋佳焕

angelocream 发表于 2016-9-28 09:12 # T2 Y* Z' d* x# ]' Q( Y* _9 s
胶原酶消化 不会被血清终止，而且血清有保护细胞的作用，所以在原代培养的时候为了保证细胞的生存率，我一般 ...

" `$ w0 X& W7 H4 d1 D1 z+ l2 e
谢谢，终于解惑了/ I) q1 D( _( V/ ^9 Z- L7 T9 l# s
我也是做原代，用的胶原酶
8 P: P9 b, c7 L1 |1 T3 a. l师兄师姐都说血清会抑制酶的活性. [+ j" W  B' |6 B
但是不加血清的话长时间消化后细胞活性很差

蒋佳焕

angelocream 发表于 2016-9-28 09:12
( ~( n  p: ^  {& S- g" y胶原酶消化 不会被血清终止，而且血清有保护细胞的作用，所以在原代培养的时候为了保证细胞的生存率，我一般 ...

% E6 T! s  }7 a% y# Q学长，不知道你还看不看得到，请问你原代消化的时候还会添加双抗防止污染吗？是1%浓度吗？因为完全培养基也是这个浓度，所有不会对细胞产生太大的影响吧

15558156935

消化过程一般不加双抗，因为双抗消化过程对细胞也是有一定损害，一般在培养过程会加1%双抗

Demon_CN

一般不需要加FBS，如果消化浓度低时间长，隔夜那种，细胞又特别珍贵需要尽可能提高活率，建议还是加，$ c) A* D; X- X$ ]. w  U: ?9 h
细胞消化成单个或者小群体还是需要能量消耗的，有可能会受损。