hiPS传代时的消化问题

stemcellmeng

如果iPS消化的时间比较长还下不来，就有可能是分化了。

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回复 fguw 的帖子3 K' a! f2 z: C3 }3 V# U! n" P  s
) B0 \4 R) `5 [9 ^. Q0 d
用PBS配的

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" J3 p/ T% P0 H& |% I  S& x' V+ M! W1 N
iPS是人的，feeder 是鼠的

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7 }: [1 K3 G/ M0 _
4 w  K) B5 g6 L3 M' c) l不会吹散吗

573639471

回复 白巧克力 的帖子8 b( c$ E5 A4 }! t; y% L

5 G% W) l1 e, O5 ]1 s+ i你买的是哪公司的？ 好用吗 用DMEM/F12配的？

BNJN

Gibco的，我实验室的hiPS、hESC传代都用，5min后看见克隆边缘有卷起就行了

白巧克力

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9 N; f) s- G. P! |# m- h
5 F6 L, j) W$ ?; Q& i  yGibco的，具体与楼上BNJN相同。

573639471

回复 fguw 的帖子
( [: K8 I2 u3 A4 r3 ]2 a( v
- T: `) x4 [/ H" T( T0 G9 O配的有什么问题？除了不应该用PBS还有吗

fguw

比较标准的是，DMEM/F12（1：1）4 A! g% s  a* ]+ \  z+ W9 }/ ~/ b
因为基础培养基就是这个，0 Y. h" E4 p; f7 i" _% l  F. Z
我们实验室做过实验，发现这个最好，

也行天下

       feeder太密了！iPS克隆中间的细胞好像已经有分化了吧，这可能也是iPS克隆消化不下来并且细胞较散的原因吧。
+ A. U2 A. ~# s6 G8 M  e% R    我们用胶原酶消化一般40-50分钟至iPS克隆明显卷边，即使克隆完全消化下来了细胞也不会像图中的那样散。
( l0 Q! @* W( @& h