脐带间充质冻存

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶
  l& }# K2 g- `/ a复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

湖南干细胞

回复 山风 的帖子! j. S9 E" p( f0 S+ p7 Q' U

/ p% X# ~5 d* j' E9 l. w! |9 X谢谢你的详细解答。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子* ]; D9 G2 @$ X' ^
1 d, n" ?. f' t$ d, p; H
用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

湖南干细胞

回复 yuheng 的帖子1 L7 ~, z; d& r. T9 W( \- M! r
; A$ l4 ]* }' a+ K+ S
谢谢指点。

湖南干细胞

回复 暖羊羊 的帖子, @8 d+ s' y; E5 R8 [! O
+ Y# v4 k& x0 A7 I
谢谢，我试试。

湖南干细胞

回复 暖羊羊 的帖子2 F2 F; Z- v/ L( m/ y. J

. B. ~/ t0 Y+ ^+ E谢谢。那细胞复苏的时候水浴用自来水还是要用去离子水？溶解完要用酒精擦冻存管不。离心时应该加入4℃的培养基稀释后离心，还是用预热至37℃的培养基稀释？

暖羊羊

冻存肯定是代次越低越好，因为传代多了容易分化，细胞长到80%-90%并且状态良好就可以冻存了。我们冻存的时候没用培养基，直接是90%血清+10%DMSO，冻存液的配方有很多，楼主可以尝试一下。

yuheng

我们用血清90%+10%DMSO的配方，但是比较浪费血清。LZ的方法也是一种标配，冻存细胞没有任何问题。
3 \. G5 Q% c8 f- R! h$ W6 T冻存细胞的时机一般是细胞活力最好的时候，也就是长到80%融合的时候。

漂泊的风

你这个配方我觉得血清的浓度低了，我们冻存血清的浓度至少要是50%，浓度低了会损伤细胞的." ]& U9 j  J2 U% J