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脐带间充质冻存   [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-2-15 12:25 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
养了批脐带间充质,打算冻存。请教那一代冻存好?是换液的时候冻存还是什么时候冻存?冻存液用哪个最好?20%FBS+10%DMSO+70%D/F12如何?请大家指教。谢谢。
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沙发
发表于 2013-2-16 09:07 |只看该作者
回复 湖南干细胞 的帖子% b( X3 [: t* t8 ?
- S- h: g* g9 C% U4 r. k
过年都没有休息,精神值得学习啊!!
5 m, j4 @- F+ i. d我觉得你的配方应该可以哈。我有时用10%血清,有时无血清。
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藤椅
发表于 2013-2-16 09:25 |只看该作者
这要根据你的具体情况而定(复苏后是继续培养还是直接发放)。要是为节约成本肯定是代次越低越好了。
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板凳
发表于 2013-2-16 12:55 |只看该作者
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回复 deshenglll 的帖子
8 i* C" N4 x" f8 w0 S4 o, r6 }- X% `" [* d! s. a& K5 E
要继续培养的。就怕传代久了复苏的活不了。

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报纸
发表于 2013-2-16 12:57 |只看该作者
回复 wind789 的帖子0 d: l+ C, c! \) b* p/ y

, g( [6 ^* L1 \. t" D  o9 y谢谢。无奈。我的细胞又污染了,之前实验室分装的血清有白色沉淀物质,不知道怎么回事。

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地板
发表于 2013-2-16 13:27 |只看该作者
你这个配方我没试过,凭经验应该可以,你可以试试看
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金话筒 优秀会员

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发表于 2013-2-16 14:03 |只看该作者
你这个配方我觉得血清的浓度低了,我们冻存血清的浓度至少要是50%,浓度低了会损伤细胞的.
& a( Z5 ]( z# o" |
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发表于 2013-2-16 15:49 |只看该作者
我们用血清90%+10%DMSO的配方,但是比较浪费血清。LZ的方法也是一种标配,冻存细胞没有任何问题。
2 m3 v7 h7 ]3 P: \- U% o冻存细胞的时机一般是细胞活力最好的时候,也就是长到80%融合的时候。
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发表于 2013-2-16 16:14 |只看该作者
冻存肯定是代次越低越好,因为传代多了容易分化,细胞长到80%-90%并且状态良好就可以冻存了。我们冻存的时候没用培养基,直接是90%血清+10%DMSO,冻存液的配方有很多,楼主可以尝试一下。
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发表于 2013-2-16 19:12 |只看该作者
回复 暖羊羊 的帖子
" Q# h2 m! L2 ~) Y8 g( e! K1 R, ^8 ?: u7 f& p% v3 a) l1 n2 {
谢谢。那细胞复苏的时候水浴用自来水还是要用去离子水?溶解完要用酒精擦冻存管不。离心时应该加入4℃的培养基稀释后离心,还是用预热至37℃的培养基稀释?
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