脐带间充质冻存

湖南干细胞

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, r8 t' C3 b, M. {9 d
谢谢，我试试。

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回复 yuheng 的帖子
" P8 H1 N6 n- S0 y) {
% n1 |2 U  O% {- n# u1 @- U谢谢指点。

山风

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2 e# v  F. Q1 ]" u& T- N
- S! M/ g$ h$ d用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

湖南干细胞

回复 山风 的帖子( d0 n  d7 [- B9 ~& g- p5 X
1 A4 |$ n4 m; D2 |1 E  @6 Z
谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶# g# T4 g% }9 z  Q( f* c4 @
复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

湖南干细胞

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0 y* z' r" Q. N1 |  t% D! M( A0 h/ w' q
这个主意好，谢谢

湖南干细胞

回复 猩猩 的帖子9 m; u( y9 f3 z( f- S
, b# W. e- Q$ X) K7 b
好的。. h) b4 ^4 M- [' F; r* ]" z- r

湖南干细胞

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! {# }2 c  I( ]3 u9 x  x: K  q6 S9 O8 ], Z- _' [
今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
' x4 z$ Z3 H0 x" E0 H  L“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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) I% k6 ]8 `7 m3 P$ \" I
7 `- H3 _& }" f冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。