用1.073的percoll分离兔子骨髓MSC，求助配置1.073g/ml的GE公司percoll的具体方法？

ytumuyangren

因全骨髓培养获取兔子骨髓MSC存在一定的弊端，因此在实验过程中想采用密度梯度离心的方式来分离MSC，看到有关兔子MSC分离所采用的percoll的密度梯度是1.073g/ml，查阅了一些配制1.073g/mlde percoll的资料，有不同的解释。, x9 q* f* B4 q
方法一：" B" i+ M9 D4 e3 M2 [; H/ r4 a
1.先用9份Percoll与1份8.5％ NaCl或1.5M PBS混合达到生理性渗透压；( Y$ t8 o) ^* Z- t% s
2.然后用生理溶液(0.85％ NaCl或0.15M PBS)稀释到所需浓度：56体积percoll：44体积NaCL或PBS。+ m6 U6 T8 n( i4 s# n
方法二：: D+ c! ^" X* P# ?
9ml percoll原液+1ml8.5%的NaCl=工作液
6 W; l1 K1 S! F% Q10ml工作液+7.9ml 生理盐水=1.073的percoll
6 H3 N  e; z3 t特此请教各位大侠，帮忙解决一下，不胜感激。

644414915

和其他物种一样目前没有特异性的

luoziwei

回复 644414915 的帖子* Z$ `# t+ ]: C
0 a8 Q* W* c, w4 B  C
兔子MSC表达哪些marker？

644414915

8 d. \6 q# ]7 @8 F! u4 e; R7 D% _1 f
回复 ytumuyangren 的帖子) _9 z, b+ M! J7 v. G, T$ D
8 B5 u" s/ y  r' q3 O% ~
关键这**吧实验简单结果居为己有，因为在人家地盘做实验所以只能低三下四的，不了了之了。

644414915

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7 {# C. z* H* v# l$ v# D& Z8 a# w8 `! O2 B7 `3 b
鉴定了，因为鉴定有神经方面mark表达，然后一个老师看了后把我细胞扔掉了；后来转做小鼠了。

ytumuyangren

最近一直忙的做实验，没有及时更新实验的最新进展，元旦前后又做了几次，都能分出单核细胞，但是分出的细胞长的太慢，呵呵，还没有达到消化传代的要求，再养养，等细胞传到p3以后再做做鉴定。

ytumuyangren

回复 644414915 的帖子. f) t: A' _. T$ C
& a& h5 J. A% h7 }
那你们养出来的细胞有没有鉴定？

644414915

但是现在让小鼠间充质干细胞把我给难道了，谁要是能养出来，我真服了

644414915

我们没分离，也养出来了，长得贼快不到两天就要传代
% T) a( U$ \4 R% |, n5 ?

pengxuleo

回复 ytumuyangren 的帖子# U+ U$ y. Z/ [+ p; B" g
" Q% d3 A* }  O* H% f
呵呵，祝你成功