有关ES培养的请教大师啊

mg1551

为什么我养的ES总是漂啊？无论是OG2还是E14

dmz

对不起，是0.2%galetin

dmz

如果贴壁效果不好，Galetin浓度可以提高到2%，或更高一些

mg1551

回复 dmz 的帖子: u; |$ C$ T" w7 c
3 @3 f7 L  d7 u4 y
Gelatin

芦苇浅

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, f$ `! k4 v; l# d; o" n% v2 q6 G' k/ |
# h8 d9 t& a' B! {0 ]) Z% j* x$ j我们一般feeder-free 的条件使用Matrigel包被的。你说转一下板会好，说明你以前用的板子可能有问题，我们的实验中很少会出现大量的克隆无法贴壁的现象，有几个漂的也是正常现象吧

dmz

可以尝试加点Knockout Serum试试看

mg1551

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" K  p- h) j/ M& H0 ~) A
. @# z; h& k6 F% T+ N0 C恩恩是的，所有因子都加了，就是漂的厉害，重新铺gelatin，转一下盘会好一些 ，但是还是 有一小半的漂着

芦苇浅

这是人的还是小鼠的ES啊，两种ES medium中添加的因子不太一样，我们使用的人的ES medium中需bFGF和LIF，而小鼠的还需要添加2i，克隆形态会更好一些。形态上看你这应该是鼠的ES吧？

dmz

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细胞状态挺好的。请问您培养皿的皿底是用什么基质包被的？Gelatin，Matrigel 还是Laminin？

mg1551

回复 cloudycity 的帖子5 R' @% E7 p: p+ n7 D

# H4 J  T5 P1 C6 v* a都加了啊，师姐他们的技术好一点，但是也是有漂的