有关ES培养的请教大师啊

mg1551

为什么我养的ES总是漂啊？无论是OG2还是E14

cleargreat

存在的问题可能很多。可能不是es哦，，先做个流式鉴定一下吧。或者上图。

dmz

有可能是培养液的问题，可以上图看看

cloudycity

1.有没有检测过支原体之类的？: H# O2 B) D! D
2.是feeder 还是 feeder-free 模式？如果是 feeder-free 2i 等小分子加了吗？我记得有一次我忘加LIF了，全飘了。还有，最好用好一点的血清···反正这些弄对了，我的e14都停不下来了~

mg1551

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mg1551

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回复 dmz 的帖子# F+ P7 L6 E1 H

+ \, Y. q. ]. g+ c这个是OG2的ES细胞

mg1551

回复 cloudycity 的帖子
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! ?7 Y, g0 e5 K都加了啊，师姐他们的技术好一点，但是也是有漂的

dmz

回复 mg1551 的帖子: d; ^0 ^' x1 d; N
/ U! i  B3 X( Y- c5 C1 h
细胞状态挺好的。请问您培养皿的皿底是用什么基质包被的？Gelatin，Matrigel 还是Laminin？

芦苇浅

这是人的还是小鼠的ES啊，两种ES medium中添加的因子不太一样，我们使用的人的ES medium中需bFGF和LIF，而小鼠的还需要添加2i，克隆形态会更好一些。形态上看你这应该是鼠的ES吧？

mg1551

回复 芦苇浅 的帖子2 M; E) i: S; C& ~, K, U
) K0 b9 L" S' |9 Q
恩恩是的，所有因子都加了，就是漂的厉害，重新铺gelatin，转一下盘会好一些 ，但是还是 有一小半的漂着