请教小鼠胚胎干细胞如何形成EB？

meiying3061

有没有做过的前辈，能不能介绍一下步骤啊？

Drturtle

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Protocol网上都有很多。关键是找一个适合你所在的实验室的。
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& r6 f$ A5 {0 b# O: ahttp://www.protocol-online.org/prot/Cell_Biology/Stem_Cells/Differentiation_of_Stem_Cell/Embryoid_Body__EB__Formation/index.html

jessewill

两种主要方法
6 L/ i" d: t8 ~9 F: j5 v% f悬浮   在细菌培养皿上培养（无吸附性）& R9 ]& `! p" n# }* g
悬滴    在培养皿中倒点PBS，保持皿内不干。在培养皿上盖上，20uL-30uL一滴的细胞培养液，2天左右就可以看到EB形成。但是要求FEEDER CELL除的很干净。这种方法速度快而且形成的EB形态一致

shangchunhua

悬浮法：将mESC按照1000 cell/ml的浓度接种到100mm的petri dish中，共加10ml培养基。每隔2-3天换液，换液时将培养基收集到15ml离心管中，在培养箱中静置15min令EB沉降下来，然后丢到上面的9ml培养基，用新鲜培养基将EB重新接种到100mm的petri dish中继续培养。