iPS分化了吗？

mohanmud

楼主细胞种的太密了， 克隆周围的可以看出明显长条形的细胞是分化的细胞，挑的时候注意剔除这些分化的细胞

song58

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+ A0 C$ s' B# u( M
' t' z: Y! o0 N8 Z- f是分化的挺严重的...7 G1 O4 h2 b6 N- Q* M
小黑圆圈？看不懂，也看不明白是什么分化方向...
; ]3 s. E; q: l% R6 cLZ好运！

wangyimei

细胞状态不好啊，是人的iPS细胞吧，形态不好，细胞克隆不紧致，呈颗粒感啊

ligangtiancai

回复 573639471 的帖子& y" m- {* r5 E

. t( B5 ]% r- }* l* a' g9 U克隆数量过多，一般情况下T75 Flask中的克隆控制在30~50最好，而且每次传代前应将分化的克隆剔除。你图片中基本上所有克隆的周边都分化了。

ligangtiancai

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% U1 C# G7 L6 a! [! M
/ j3 ~- G  p6 r0 J) {, a这是我刚买回来时候的克隆形态，整个T25中就不到10个克隆。你中间的小黑点是因为细胞密度过密。也是要去除的

ligangtiancai

回复 ligangtiancai 的帖子  v* h# R0 @5 D6 y4 Y' ]
9 P5 z! a4 k6 }  r
忘上图了

dilal

很明显是分化了，细胞集落和集落之间已经融合了，而且集落边缘出现了上皮样的细胞形态。细胞生长时间太长或者传代密度过大的原因，集落中间已经发黑，并出现空洞现象。建议弃掉

xiphias

我觉得分化的很厉害啊。。
3 S' {7 ?4 y5 H5 H1 g你做个qPCR 看看oct4 还有分化marker吧。

573639471

回复 xiphias 的帖子8 x, K- q* ?- |5 {' E

- w. M% _! X5 D/ G7 lOCT4  只要表达就可以吗，是不是只有内源的表达才可以

xiphias

回复 573639471 的帖子( K+ W" B% I* U& t

# E9 D! T8 F/ g/ F' G$ e  m当然有一定倍数。500-2000倍吧。内源的。有时候外源基因会不沉默。我觉得你养的这些克隆都不太好呢。