iPS分化了吗？

也行天下

回复 frankieisme 的帖子1 k( |2 ^1 Q) L" a
- Z- q! ?: G6 ~
我觉得红圈圈起来的是传代时克隆太大了出现的结块现象吧，周边的倒像是分化了的。不知道对不对。我在进行iPS细胞传代时如果克隆太大就会出现克隆中间呈棕色现象。

katysong

回复 573639471 的帖子
  p: g1 e" }; e0 K1 [+ C( D5 `: i0 C+ u, m: a3 F; h
培养干细胞很多时候都要用机械法传代的，挑取好的克隆或是把已分化的克隆刮掉，有几种比较典型的分化情况分享一下：
7 r. B* `% V' b. x8 N) Z1. 克隆团中间塌陷，形成“孔状”，中间即为分化的细胞；6 G/ o! n. @/ s0 q) h+ X
2. 网状结构，不够致密，可能来源于已分化的干细胞或是上次传代残留的Feeder；
. N! b3 ^! t4 j' X% b0 I3. 有中间隆起的发黑的细胞团应该是已经分化并死亡的细胞（个人感觉楼主的细胞有这种情况，应该之前就应该传代的，时间稍微晚了一点）；9 L: n: B! _( A2 E
4. 还有一些克隆状态不好的，边缘会比较“混乱”，中间细胞形态也不均一，也应该舍弃；
# [9 e8 }7 {8 ]+ e$ l. N8 a- r3 L或许有不对的地方，希望对您的实验有所帮助……

sunny2829

回复 573639471 的帖子4 r8 i, r0 K& I4 R3 H5 y
, o8 Z6 U7 ^! \* G3 ?* C
个人认为那是未完全重编程的克隆，多层细胞，边缘细胞为不规则多边形，形态上与典型的ES克隆差别挺大的。

wangyimei

回复 573639471 的帖子
: v1 H" W! q$ K& k) _/ M* [! E8 p
* {2 o/ [/ A1 S6 \啊，这样啊，状态看着不是很好啊，看看从哪买来的，找他们的人问问看

dianying

回复 573639471 的帖子/ O# W/ h* k' L; H

* e) p$ G8 I5 ^# K$ C1 f; ?你确定是黑孔吗？如果是上面的一层膜，你可以试着拿针剥离开，看看底下的要是没分化，就还可以把它传代。

murry

周围已经分化了。污染了的细胞应该立刻马上处理掉！再放在培养箱内，或者打开盖子的话，很可能会把细胞房的环境污染掉！那就杯具了！

Jonathan

回复 song58 的帖子
0 f) f# z8 p) y" H) ?8 p  `5 M# R- V
你不要在这里误导他了。你画圈的这些克隆，没有一个好的。应该说，LZ的图片里面，没有好的克隆。基本都分化了。如果是我，就扔了。重新做。

lchanlon

你是不是加了ROCK inhibitor啊，如果没加的话应该是分化了。

573639471

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: ]1 b$ c  X1 R6 S$ ?# R2 ?/ K. _! L6 r
加了

荣荣荣

我以前机械法将细胞挑出来的时候，就是这个样子，过一段时间就展开了，即使不展开又用胰酶消化继续传代就好了。