iPS分化了吗？

mohanmud

楼主细胞种的太密了， 克隆周围的可以看出明显长条形的细胞是分化的细胞，挑的时候注意剔除这些分化的细胞

song58

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' @4 ^4 S9 \$ ~8 w5 g: |/ Y是分化的挺严重的...
. F- W7 d, A6 R  q5 W7 W! n7 }小黑圆圈？看不懂，也看不明白是什么分化方向...
9 K2 ]  V7 N( M+ J, W0 F/ ~3 `LZ好运！

wangyimei

细胞状态不好啊，是人的iPS细胞吧，形态不好，细胞克隆不紧致，呈颗粒感啊

ligangtiancai

回复 573639471 的帖子$ y$ K, `; }/ ^2 Q* C4 T
9 k$ v) o' i- D4 X% l, y' g
克隆数量过多，一般情况下T75 Flask中的克隆控制在30~50最好，而且每次传代前应将分化的克隆剔除。你图片中基本上所有克隆的周边都分化了。

ligangtiancai

回复 573639471 的帖子  g3 x) c4 A0 o

  p' Z$ H! k. S: v' V" b这是我刚买回来时候的克隆形态，整个T25中就不到10个克隆。你中间的小黑点是因为细胞密度过密。也是要去除的

ligangtiancai

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& u( M5 l" ~, e  a/ m' J; ~: p* R6 Z& o) w
忘上图了

dilal

很明显是分化了，细胞集落和集落之间已经融合了，而且集落边缘出现了上皮样的细胞形态。细胞生长时间太长或者传代密度过大的原因，集落中间已经发黑，并出现空洞现象。建议弃掉

xiphias

我觉得分化的很厉害啊。。
9 p& f, S5 p( ~, Q% w  Y你做个qPCR 看看oct4 还有分化marker吧。

573639471

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3 M: X5 L: J% {  }7 W: F' Y
# `* O+ |; U; i3 uOCT4  只要表达就可以吗，是不是只有内源的表达才可以

xiphias

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) s: N0 `0 o& R! X* |2 i# M3 p& U7 `# |- h& c( m
当然有一定倍数。500-2000倍吧。内源的。有时候外源基因会不沉默。我觉得你养的这些克隆都不太好呢。