iPS分化了吗？

也行天下

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8 ^2 s9 ~- d& b3 b( X# N/ f- k! J& V8 Q/ f% Z7 H, h
我觉得红圈圈起来的是传代时克隆太大了出现的结块现象吧，周边的倒像是分化了的。不知道对不对。我在进行iPS细胞传代时如果克隆太大就会出现克隆中间呈棕色现象。

katysong

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$ R3 a- c0 N% b3 h# x) q! j5 G& i/ d
培养干细胞很多时候都要用机械法传代的，挑取好的克隆或是把已分化的克隆刮掉，有几种比较典型的分化情况分享一下：2 p+ I# a/ t3 ^5 L& D
1. 克隆团中间塌陷，形成“孔状”，中间即为分化的细胞；2 O/ y8 q/ _+ d, B- l
2. 网状结构，不够致密，可能来源于已分化的干细胞或是上次传代残留的Feeder；
& f/ s) u" N; i2 |3. 有中间隆起的发黑的细胞团应该是已经分化并死亡的细胞（个人感觉楼主的细胞有这种情况，应该之前就应该传代的，时间稍微晚了一点）；- \4 |6 f& ~' t- R
4. 还有一些克隆状态不好的，边缘会比较“混乱”，中间细胞形态也不均一，也应该舍弃；
  M  V& y  U6 L) T' M5 z; `9 i或许有不对的地方，希望对您的实验有所帮助……

sunny2829

回复 573639471 的帖子* b1 N3 h1 H8 i' |3 z  x& _  m# ~' Q$ o

8 J# l- u5 o: A5 t4 y个人认为那是未完全重编程的克隆，多层细胞，边缘细胞为不规则多边形，形态上与典型的ES克隆差别挺大的。

wangyimei

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* U5 R$ g' o: L. s1 P
, j$ t+ n0 f# z" Q( m3 |啊，这样啊，状态看着不是很好啊，看看从哪买来的，找他们的人问问看

dianying

回复 573639471 的帖子, e' V1 Z7 B' h0 t* L3 ]
( C  N6 h: c; q" O8 v2 b, M  A- ^
你确定是黑孔吗？如果是上面的一层膜，你可以试着拿针剥离开，看看底下的要是没分化，就还可以把它传代。

murry

周围已经分化了。污染了的细胞应该立刻马上处理掉！再放在培养箱内，或者打开盖子的话，很可能会把细胞房的环境污染掉！那就杯具了！

Jonathan

回复 song58 的帖子: `! n) \/ e' }6 i1 R( {
3 H- D! V+ H0 l! B1 s( c
你不要在这里误导他了。你画圈的这些克隆，没有一个好的。应该说，LZ的图片里面，没有好的克隆。基本都分化了。如果是我，就扔了。重新做。

lchanlon

你是不是加了ROCK inhibitor啊，如果没加的话应该是分化了。

573639471

回复 lchanlon 的帖子3 t* {( E% i0 E" X$ x: B* c' b

$ V# x& E: |1 W6 Q# B加了

荣荣荣

我以前机械法将细胞挑出来的时候，就是这个样子，过一段时间就展开了，即使不展开又用胰酶消化继续传代就好了。