求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

4 ^7 I+ Z1 e6 d( t# i

2 c  q/ }! z4 |4 N! J! a% F* ^     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

jhu132llh

7 }6 k& z0 j9 D6 G
' B$ _5 D. t* @( l  _& u
接种的问题' |& v, T; j3 {1 h1 M0 [0 K4 ?
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞; A9 k3 j. ?! ?8 M% `; I+ g/ G1 [2 m
因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

quge_00

0 q9 m+ e  f' ^1 |
* G4 ?% v- A6 K* X1 }
回复 Tim 的帖子, {0 _9 a7 p& g% m: K4 \; A
3 e4 E3 ^* j6 [, r, H
1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；* x: C, T: Y& Q  e
2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；& M  N+ Q& S. M1 k% j( H
3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，
; Z: H( I8 }% O5 f' V3 l/ v小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间/ Q! a8 w2 X  z' b
（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）  Y- R# k' u' A' r. H" ]
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

Tim

回复 quge_00 的帖子
0 P9 K+ _. b  h" s2 W) }: J! e, [  I7 C: U; i5 w: H
方法极好！非常感谢！

小渝

回复 Tim 的帖子2 Z$ L- @/ g( P7 f0 j/ \( q( ~
7 p0 b3 M. g) ^& E
我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

回复 小渝 的帖子
. v4 m9 B8 d9 n0 L5 V2 ~9 s0 P0 M& J, @- v
这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

回复 Tim 的帖子
  i/ I7 P% i) K. s
- i) x; t; Z5 o, w8 f& f不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了