求助！玻片细胞贴壁问题！

Tim

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/ {2 ]( D/ J. ?0 d9 v, U     我最近想鉴定我养的神经细胞！拿24孔板养的！但是细胞不往玻片上贴壁！玻片周围长的很满！ 希望大侠给点建议！经验！玻片多聚赖氨酸处理过10min！

jhu132llh

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接种的问题( \2 C1 O) `4 ~0 G
接种的时候应该是先铺玻片然后接种细胞: e! r5 \7 o1 a
因为有些细胞是不喜欢主动爬上玻片的

quge_00

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& y* p' P) y+ }* N* T( H7 {" _+ _. f; @# K1 ?! x: c
1、先在孔内铺好灭菌玻片，确保玻片干燥；
8 K# K: p6 n' G9 x7 e2、消化细胞，新鲜培养基重悬细胞；
- L! Z; Y2 T  }* P$ y/ E) i% k3、细胞悬液滴在水平放置的玻片上，利用液体表面张力的原理，
# d2 z& {4 T6 o. g小心勿使悬液流出玻片边缘流到孔内，培养箱内或超净台内静置一段时间
0 k5 B  [5 d* g3 ?4 f( g2 o3 L  p（具体看细胞种类，几分钟到半小时应该会贴壁了吧）- V' Y% o4 K, D  N( P* \
4、贴壁后，孔内加入培养基，要避开玻片，小心冲掉细胞~

Tim

回复 quge_00 的帖子- t& e0 v. d& o
& g. v' j7 h7 T$ ]: [' Y
方法极好！非常感谢！

小渝

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我用的是先将玻片包被，然后自然风干，放于需接种的板孔了，然后根据所养细胞培养体系重悬细胞，浓度较大，然后滴于玻片中央，小心倾斜使培养液覆盖完整张玻片，避免流出玻片，最后在培养箱培养，各种细胞贴壁的时间不一样，我的细胞需要24h后贴壁才会比较牢固。

Tim

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3 C  x0 s/ F+ i2 {8 H' A  `/ Q这样加培养液后细胞！玻片会飘起来的！

小渝

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0 z' ]! U# ?$ V3 F4 [5 S& H4 Y) c/ C! l7 E4 {# o/ S
不会呀，我总共滴加的培养液就是大概刚好覆盖整个玻片就够了