流式抗体可以做免疫组化吗？

huajie881026

买了BD的鉴定MSC的流式抗体，鉴定完了，现在将细胞打入动物模型，想做个免疫组化看一下细胞是否募集过去，请问我能用做流式的抗体吗？BD的这个抗体是直标的，能做吗？. [3 f4 P( |/ @

86964109

直标的话信号会相对较弱吧，个人感觉还是别浪费了吧

sysuhoo

这个是可以做的，不过楼主的方法有问题。3 }( Z9 V4 s$ x; i0 |& I
按照你的思路是不能看外源MSC迁移的，最好的方法是用gfp标记外源msc后注入: w6 |9 a( G9 z/ V& F! a
因为你的方法也能检测内源的msc，而且msc在各个组织都有) @1 W" y" {0 c! n% b0 v) T; p
个人意见，仅供参考

ljs

1.楼主做流式的抗体，如果做组织切片的话，应该是免疫荧光，而不是免疫组化。& I  z- D. v% `  z8 \
2.有的流式抗体可以做免疫荧光，有的不可以。而且对组织切片有要求，如固定方法，石切还是冰切，以及抗体的稀释倍数等。
# e5 P) E& V+ v3 {  M8 L% \3.也是我个人的意见，不推荐这样做实验。
3 v5 w- O' ^* @! P7 Z（1）首先楼主要看抗体的说明书，进口的流式抗体的说明书都有说明抗体的适用范围。& W' W( E+ M/ A+ L" m
（2）流式抗体都是一抗标记荧光基团，如果做免疫荧光，没有二抗的扩大信号，很可能结果会出现假阴性。& I- L1 C  q5 l  I1 A) v% c: M
4.总而言之，能否应用在免疫荧光，看抗体的说明书，如果说明书明确说明不能做其他的实验类型，就不能做。如果没有明确说说适用范围，楼主可以打电话给技术支持。

huajie881026

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" o/ J9 c2 M6 L4 k' L7 |4 M$ l3 J4 x
谢谢指教！抗体说明书上是没有写免疫荧光这一项的，只写了FCM，也没有说能不能做免疫荧光之类的。! |- J0 F* E% H1 Y2 I
再次感谢您的解答！

aidiulgy9517

回复 huajie881026 的帖子9 D) |% [" Z& |2 h
; O% G' Z' S. C  v$ N' ]
可以在用荧光抗体免疫染色（流式分析）后将MSCs滴在玻片上，用荧光显微镜观察，看荧光信号是否足够强，然后再决定能否做免疫荧光组化。

yaolinzhang

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  i9 W; G: V$ n! ]
. a  ]1 R. u' D3 z+ J% y6 }; G! A  I说明书上没写免疫组化，个人感觉好像不能用，楼主还是重新定购相关试剂吧

yubin083

只有一部分FACS用的荧光可以在免疫荧光镜下观看，这些在相关荧光谱上都有说明。另外你可以用抗一抗（直接法FACS）或抗二抗（间接法）抗体再次标记，就可以做免疫组化