流式抗体可以做免疫组化吗？

huajie881026

买了BD的鉴定MSC的流式抗体，鉴定完了，现在将细胞打入动物模型，想做个免疫组化看一下细胞是否募集过去，请问我能用做流式的抗体吗？BD的这个抗体是直标的，能做吗？5 s* Q# }* e4 R7 K' Y( Y

86964109

直标的话信号会相对较弱吧，个人感觉还是别浪费了吧

sysuhoo

这个是可以做的，不过楼主的方法有问题。. {7 \; G' P5 [# v* y. K
按照你的思路是不能看外源MSC迁移的，最好的方法是用gfp标记外源msc后注入
; h. }" a. f7 G( u* ^因为你的方法也能检测内源的msc，而且msc在各个组织都有
, L* A& ?2 V4 E4 w4 K个人意见，仅供参考

ljs

1.楼主做流式的抗体，如果做组织切片的话，应该是免疫荧光，而不是免疫组化。
1 k7 U& t8 G( t: h5 P2.有的流式抗体可以做免疫荧光，有的不可以。而且对组织切片有要求，如固定方法，石切还是冰切，以及抗体的稀释倍数等。& J% R* N8 a# k. _
3.也是我个人的意见，不推荐这样做实验。# b$ o; @" k7 D/ R" T$ g
（1）首先楼主要看抗体的说明书，进口的流式抗体的说明书都有说明抗体的适用范围。0 J, K8 e1 \7 a6 z* d- A* a
（2）流式抗体都是一抗标记荧光基团，如果做免疫荧光，没有二抗的扩大信号，很可能结果会出现假阴性。/ Q  s. C  U' G" z* `2 R
4.总而言之，能否应用在免疫荧光，看抗体的说明书，如果说明书明确说明不能做其他的实验类型，就不能做。如果没有明确说说适用范围，楼主可以打电话给技术支持。

huajie881026

回复 ljs 的帖子6 Q4 g) I) ?$ a) E0 q2 u1 R9 W

  r1 z5 X2 ]: V谢谢指教！抗体说明书上是没有写免疫荧光这一项的，只写了FCM，也没有说能不能做免疫荧光之类的。
4 x4 U9 r7 K- r/ h. Q7 W再次感谢您的解答！

aidiulgy9517

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可以在用荧光抗体免疫染色（流式分析）后将MSCs滴在玻片上，用荧光显微镜观察，看荧光信号是否足够强，然后再决定能否做免疫荧光组化。

yaolinzhang

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5 ?7 {( R) Z. Z  `5 s* @8 w) B) L
2 K2 T% B2 F+ w3 s% w5 {( k说明书上没写免疫组化，个人感觉好像不能用，楼主还是重新定购相关试剂吧

yubin083

只有一部分FACS用的荧光可以在免疫荧光镜下观看，这些在相关荧光谱上都有说明。另外你可以用抗一抗（直接法FACS）或抗二抗（间接法）抗体再次标记，就可以做免疫组化