脐带间充质冻存

湖南干细胞

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" @/ O6 v2 d4 o! U% H8 V5 H, m谢谢，我试试。

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: g$ T1 t5 Q! s" g, T
! P; V. q0 x' ^3 U, X8 k谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子& \$ u# U* D9 E7 l. {5 s

0 Y) ?: q5 u- D2 k4 \% f1 P用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

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回复 山风 的帖子; w: P3 J+ }" g2 P( g8 ?& V' k
! k: G! X6 m0 |5 x" X& K* `1 P- e
谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶
. r2 J+ G; T. j复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

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1 Q  V$ |* |, H0 k8 I/ b0 J; \( ^) L8 ?7 j. j& `% Y0 v# j
这个主意好，谢谢

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6 }% n" M7 ]. }6 Y5 b) J7 u, G: A% y" S0 o% i
好的。' C' D9 j; O3 c, d  u; d

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+ i* S! m  r- K7 l
3 w; _( R$ u; a  ~, c7 }今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
- p( e% {5 b% k% [+ Q/ @“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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7 p; H1 {9 w- ]5 o9 E4 d, C0 ^冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。