脐带间充质冻存

湖南干细胞

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9 h' n0 H- F- ]) M谢谢，我试试。

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7 \  G6 a* O) I
4 ]3 c7 R5 I8 P谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子; m& C) A1 l1 P  f& p. M
, ^: v! r. ?) _) [
用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

湖南干细胞

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; ^) H. c& K" k- b) R
+ Y, M4 V2 G- x6 z, z% W- b0 E谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶
. }0 L" H( b7 A  @4 K! L复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

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回复 xiaolong 的帖子8 M) V. o+ u4 }) i" L7 F

! Q8 @  }' P/ p6 |" D# O这个主意好，谢谢

湖南干细胞

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& K$ w9 x+ c9 [0 U; n' V好的。% o4 Q& [- [2 j3 M. r+ [+ i6 b

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: B, Z2 q. E& u$ m9 Z2 g# c5 ]
' z- t9 _/ y  n/ T% ]$ x8 q今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
/ y: R* W0 V* L“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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7 `" O; G' ]" {% B; `& |- K
; _4 B; Y0 Z$ [! A4 ?- ~冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。