脐带间充质冻存

湖南干细胞

回复 暖羊羊 的帖子, z8 I0 e( }# t5 r/ O

% B1 Z, M: \4 |6 f. T9 t谢谢，我试试。

湖南干细胞

回复 yuheng 的帖子
2 t/ L0 L" p3 d- u+ h9 L& H1 d% R! x" P; c) ~- x) [5 Q
谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子% O5 f/ K  x* H" j8 }

3 U' M! k  d! O( D用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

湖南干细胞

回复 山风 的帖子
) Z# @5 K6 O8 m1 ?9 z" b6 T" n; G+ k# J9 n
谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶
' H5 S9 I- M1 V" X  A复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

湖南干细胞

回复 xiaolong 的帖子$ ~- d' s, \$ y! R1 i
! h# r( \% _8 }. X& J9 ~  G7 W
这个主意好，谢谢

湖南干细胞

回复 猩猩 的帖子
8 e6 ^' R4 ?* \1 x; N3 q, H; _0 C& ^  f3 t8 j
好的。
: [! o  g- O* q

湖南干细胞

回复 山风 的帖子) y( A0 S+ i) [8 h2 n- @
' v7 z" c- \( H# J$ a7 s6 ]
今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
& [- F6 R$ y3 P1 q3 o8 H  A0 ?“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

回复 湖南干细胞 的帖子6 Q/ q0 P' j& f

0 {1 l3 @, }% C; T冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。