脐带间充质冻存

湖南干细胞

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/ F& ~) Q. o9 G: E0 k1 i
6 d" n- m) }2 p- ~% r& v谢谢，我试试。

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* t" Z% `' G0 T6 z) R# R9 x
: W$ U$ z, F/ o! Q- \谢谢指点。

山风

回复 湖南干细胞 的帖子7 |! J3 o' D/ F) v. I1 C1 [

) f3 x4 H' f) b' [3 {用桶装纯水就行，这样对水浴锅好，还方便，用自来水有水垢（影响水浴锅），水温37℃-40℃，要用酒精擦冻存管，离心时用4℃培养基（或PBS、生理盐水），不要用预热培养基。

湖南干细胞

回复 山风 的帖子! x: b" \$ m$ h7 q' R" v5 {/ @+ J
; S$ Y; }% H" d1 K+ t+ ?1 A( i
谢谢你的详细解答。

xiaolong

20%的血清应该可以满足细胞的正常生理状态，比例再高点当然最好了，但是20%的影响不大，多了浪费血清，可以冻存复苏细胞试试，做下对比，测个活率

猩猩

我们是 90%血清+10%DMSO，冻存是，要看你的细胞量是多少，你要冻存几管，每管干细胞的浓度是多少，从而计算出你要养多少干细胞，传几代、养几瓶* c8 |# v, e; U! _9 ?1 `
复苏是要用PE 手套包住，用37度水浴，遵守慢冻速溶原理，祝你成功！！！！

湖南干细胞

回复 xiaolong 的帖子0 s  w) {/ V9 w0 R: v! n* d' y

& v# L; w+ y9 G) N这个主意好，谢谢

湖南干细胞

回复 猩猩 的帖子) M( D! ~+ V% Q1 d: v& s0 `

' w7 p3 [/ o+ C: j3 a. I好的。+ l# c: C; n# |7 U: ]! x- m

湖南干细胞

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1 }" L* \9 K. w& ]4 [. r& @) p" B* L2 ~3 B
今天看了一份资料，说“如果从液氮中取出，管内有少量液氮要先-80℃放置10-30分钟，使液氮完全挥发再复苏，避免危险。 ”是不是瓶口没有拧紧会出现这种情况？
$ B- X/ }3 ?2 U2 s1 T7 h“移液器移去冻存管中的冻存液后，用培养液洗2次冻存管”，你有没有这么做，没有这一步，冻存管的细胞会损伤很多吗？

老姜

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5 |& `  j, k& s: z- F+ ~
冻细胞的代数越低越好，9楼说的没错！冻的前一天给细胞换个液，细胞状态会更好。冻细胞血清质量越好冷冻效果越好。要慢冻速融。